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紫花苜蓿MsMAX2的克隆及功能研究

文献类型： 中文期刊

作者： 马琳;温红雨;王学敏;高洪文;庞永珍

作者机构：

关键词： 紫花苜蓿 ; MsMAX2 ; 分枝 ; 互补试验 ; 酵母双杂交

期刊名称：中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2021 年 54.0 卷 19.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： [背景]分枝是重要的产量构成因子,在紫花苜蓿育种中至关重要.发掘紫花苜蓿分枝相关基因并明确其作用机理,有助于加快紫花苜蓿高产优质育种.MAX2是重要的分枝相关基因,参与多种植物的分枝调控.[目的]通过对紫花苜蓿MsMAX2功能的研究,为建立MsMAX2调控紫花苜蓿分枝发育分子机制奠定基础.[方法]利用同源克隆的方法从紫花苜蓿中获得MsMAX2的基因序列.通过Expy Protparatam、DNAMAN和MEGA-X等软件对MsMAX2进行序列分析并构建系统进化树.采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析MsMAX2在紫花苜蓿中的组织表达特异性.运用烟草瞬时表达系统确定MsMAX2蛋白的亚细胞定位.利用农杆菌介导的转化方法获得转基因拟南芥,以明确MsMAX2的基因功能.用酵母双杂交技术探明与MsMAX2互作的蛋白.[结果]MsMAX2包含长度为2136 bp的开放阅读框,编码由711个氨基酸构成的蛋白,属于F-box蛋白超家族.系统进化分析表明,MsMAX2及其同源基因的进化与物种的分化高度相似,表明其是一个功能保守的基因.MsMAX2在紫花苜蓿的颈部组织中表达量最高,苗期叶片和授粉当天的花序中表达量较高,根中次之,其他组织表达量相对较低,暗示其在紫花苜蓿多个组织中发挥作用.亚细胞定位试验表明MsMAX2蛋白定位于细胞核中.在拟南芥max2突变体中过表达MsMAX2可互补突变体的多分枝表型.酵母双杂交试验表明MsMAX2与激素受体D14存在依赖于独脚金内酯的相互作用.[结论]获得在紫花苜蓿颈部组织中高水平表达的MsMAX2,其编码的蛋白定位于细胞核中;MsMAX2在拟南芥多分枝突变体max2中过表达时,能够互补突变表型,表明MsMAX2参与植物的分枝调控,其功能保守.

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[1]紫花苜蓿MsFtsH8基因的克隆及功能分析. 余倩文,李明娜,龙瑞才,杨青川,康俊梅,郭长虹. 2021

[2]过量表达紫花苜蓿MsHB7基因对拟南芥耐旱性的影响. 候怡谣,李霄,龙瑞才,杨青川,康俊梅,郭长虹. 2021

[3]低温干旱环境对紫花苜蓿根颈耐寒性的影响. 徐洪雨,甄莉丽,李钰莹,董宽虎,李向林. 2021

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