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表达AAL蛋白重组减毒猪霍乱沙门菌的构建及生物学特性评价

文献类型： 中文期刊

作者： 蒋华正;黄鑫;赵靖;杨珊珊;杨静;王金泉;刘光亮

作者机构：

关键词： 橙黄网孢盘菌凝集素(AAL);猪霍乱沙门菌;生物学特性

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为构建表达橙黄网孢盘菌凝集素(AAL)的重组减毒猪霍乱沙门菌，将AAL基因克隆至原核表达载体pTrc-His2A，并通过电穿孔的方法将重组质粒pTrc-AAL转化至减毒猪霍乱沙门菌ΔRposΔslyAΔslrp内，获得了重组减毒沙门菌ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-AAL)，利用Western-blot检测AAL蛋白的表达，并对重组菌株的生物学特性进行评价。结果显示，携带AAL基因的重组减毒沙门菌ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-AAL)构建成功并表达AAL蛋白；重组菌株ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-AAL)的生理、生化特性与ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-His2A)菌株相似；与野生株(WT)相比，重组菌株ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-AAL)在对数期的生长速度略慢于野生株，且对抗生素氨苄西林和阿莫西林敏感，而运动性和生化特性与野生株相比无显著变化；LD50结果显示，重组菌株ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-AAL)的LD50较野生株提高了8.81×105倍以上。综上所述，本研究成功构建表达外源蛋白AAL的重组减毒沙门菌ΔRposΔslyAΔslrp(pTrc-AAL)，为深入探究AAL生物学功能和开发靶向M细胞的黏膜疫苗奠定了基础。

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