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洛岛红鸡卵黄囊源性间充质干细胞的分离培养及其分化潜能研究

文献类型: 中文期刊

作者: 闫炎;关伟军;姜运良

作者机构:

关键词: 卵黄囊;间充质干细胞;洛岛红鸡;生物学特性;分化潜能

期刊名称:畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2024 年

页码:

收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)

摘要: 旨在体外获得并培养洛岛红鸡卵黄囊间充质干细胞(chicken yolk sac mesenchymal stem cell,cYS-MSCs),检测其体外增殖能力和生物学特性。本研究选取已孵化12天的健康洛岛红鸡受精蛋的卵黄囊进行组织贴壁培养,选择第5代cYS-MSCs进行免疫荧光和RT-PCR检测表面标记基因;选择第3代、第9代和第15代cYS-MSCs,每代次设置3个重复,绘制生长曲线、计算群体倍增时间和克隆形成率;通过核型分析检测遗传稳定性;选择第9代cYS-MSCs进行成脂、成软骨和成骨诱导,通过特异性染色和RT-PCR检测多向分化能力。结果,分离培养的细胞为长梭形,呈漩涡状或平行式生长;免疫荧光结果显示CD29、CD73、CD90和CD166呈阳性表达,而造血干细胞标记基因CD34和泛白细胞标记基因CD45不表达;RT-PCR结果显示CD29、CD44、CD73、CD90和CD166表达,而CD34和CD45不表达;cYS-MSCs呈“S”型增长,且第3代的群体倍增时间极显著低于第9代(P<0.001),第9代群体倍增时间极显著低于第15代(P<0.001),第3代的克隆形成率极显著高于第9代(P<0.001),第9代极显著高于第15代(P<0.001);染色体核型分析结果显示经过连续传代的cYS-MSCs染色体数量、形态正常(2n=78,zz);诱导分化的cYS-MSCs,特异性染色和RT-PCR结果显示cYS-MSCs可被成功诱导分化为成脂肪细胞、成软骨细胞和成骨细胞。综上,本研究成功从鸡胚卵黄囊中分离获得MSCs,且能在体外培养增殖,并且分离的cYS-MSCs具有MSCs的生物学特性和多向分化潜能,其多向分化潜能预示细胞移植的前景,可为洛岛红鸡种质资源保存提供依据和潜在可利用资源。

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