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猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王克雄;刘智;周涛;李彬;彭丹;王子建;江熙;万荣杰;夏伟;林艳;李三鹏;曹丽艳;李凯

作者机构：

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV);N蛋白;抗体检测;阻断ELISA

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为建立快速、特异且适用于临床的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）抗体检测方法，本研究以重组TGEV核衣壳（N）蛋白为包被抗原，通过优化抗原包被浓度、血清稀释度、酶标抗体稀释度及孵育时间与温度等关键参数，构建阻断ELISA体系，并对其性能与临床应用价值进行评估。结果显示，该方法的最优反应条件如下：抗原包被浓度为1.0 μg/mL；血清稀释度为1∶2，37 ℃孵育45 min；酶标抗体稀释度为1∶12 000，37 ℃孵育30 min；显色时间为10 min。特异性试验结果表明，该方法与猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪轮状病毒（PoRV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪萨佩洛病毒（PSV）等常见猪源病原的阳性血清均无交叉反应，特异性良好。可检出1∶32稀释的TGEV阳性血清，灵敏度与商品化试剂盒相当。批内与批间重复性试验的变异系数均小于10%，检测试剂在4 ℃保存12个月仍保持稳定。临床应用结果显示，用该方法对124份临床猪血清样本进行检测，与商品化TGEV抗体检测试剂盒的符合率达96.77%，κ值为0.93，表明二者检测结果高度一致。综上，本研究建立的TGEV N蛋白阻断ELISA抗体检测方法具备良好的特异性、敏感性、重复性及稳定性，可用于TGEV流行病学调查及疫苗免疫效果评估，为猪传染性胃肠炎的科学防控提供可靠技术支撑。

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