猪细小病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
作者: 帅文娜;郭子强;李佳乐;罗梦;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;童光志;李兆龙;高飞
作者机构:
关键词: 猪细小病毒;NS1蛋白;TaqMan实时荧光定量PCR
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2024 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 本研究通过对猪细小病毒(PPV)1型非结构蛋白NS1基因保守序列进行设计,建立了PPV的TaqMan实时荧光定量PCR方法,实现了对PPV1的快速检测。结果显示,该检测方法的Ct值与标准品质粒在1.0×1010 copies/μL~1.0×104 copies/μL具有良好的线性关系,曲线回归方程为y=-3.618 6x+42.01,R2=0.99,扩增效率为189%;重复性好,组内与组间变异系数均低于1.089 8%;敏感性好,最低检测限度为1.0×101 copies/μL;特异性强,不与猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、非洲猪瘟病毒之间发生交叉反应,并用该方法对临床样品与病毒拷贝数进行了检测。表明本研究建立的方法重复性好、敏感性高、特异性强,适用于对PPV进行临床检测与诊断。
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