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含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王建科;吴国华;叶奕优;颜新敏;朱海霞;李健;朱彩珠;张强;王雯慧

作者机构：

关键词： FMDV;启动子P7.5;P1-2A基因;3C基因

期刊名称：甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2009 年 44 卷 01 期

页码： 15-20

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法分别扩增口蹄疫病毒O/China99毒株的P1-2A和3C基因,将P1-2A基因连接到pUC119载体,3C基因连接到pMD18-T载体,分别得到重组载体pUC119-P1-2A和pMD18-T-3C;将重组载体pUC119-P1-2A用HindⅢ、BamHⅠ酶切,重组载体pMD18-T-3C用BamHⅠ、NheⅠ酶切;利用酶切所得到的基因片段P1-2A、3C有共同的BamHⅠ酶切位点,实现基因P1-2A、3C的连接,构建重组载体pMD18-T-P1-2A-3C.将基因P1-2A-3C与启动EGFP表达的双向串连痘苗病毒启动子P7.5相连,构建载体p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C,并进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果表明:试验成功构建了一侧启动表达P1-2A-3C基因,一侧启动表达标记基因EGFP的表达盒p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C.

分类号： S852.65

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