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弓形虫GJS株致密颗粒6基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 张燕丽;曹丽艳;芦赟;蔡志杰;王艳华;付宝权;李文卉;张德林

作者机构：

关键词： 刚地弓形虫;致密颗粒6;基因克隆;真核表达

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2010 年 04 期

页码： 363-367

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank数据库中弓形虫RH株GRA6基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增GRA6基因,导入真核表达载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO,转化大肠杆菌DH5α,经酶切、PCR及测序鉴定,将重组质粒转染BHK-21细胞。GFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液中有一条约52 ku的条带,可被山羊抗弓形虫超免疫血清识别,大小与预测值相符。表明真核表达质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-GRA6中的GRA6基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。

分类号： S852.7

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