数字农科院2.0

甜菜夜蛾拓扑异构酶I氨基酸突变对其DNA解旋活性的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 张兰;张燕宁;贾伟;蒋红云

作者机构：

关键词： 甜菜夜蛾;拓扑异构酶I;突变;氨基酸替换;DNA解旋活性;pBR322

期刊名称：昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2015 年 58 卷 09 期

页码： 933-940

收录情况： 北大核心

摘要： 【目的】为了探究甜菜夜蛾Spodoptera exigua拓扑异构酶I(topoisomerase I,Top I)氨基酸突变对其DNA解旋活性的影响。【方法】通过克隆甜菜夜蛾Top I基因,构建原核表达载体,采用完全重叠PCR定点突变技术,向甜菜夜蛾Top I的V420,L530,A653和S729(根据人Top I氨基酸序列编号)4个位点引入突变,将改造成功的重组Top I基因转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导重组蛋白表达、纯化,测定Top I突变对其解旋活性的影响。【结果】完全重叠PCR能实现甜菜夜蛾Top I定点突变。重组蛋白在体外得到稳定的表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析在96.0 k Da处出现特异性条带。通过对重组蛋白分离纯化并测定对质粒p BR322解旋酶活性,发现引入V420I,L530P和A653T突变后Top I的比活力显著降低,而引入S729T突变后比活力与野生型蛋白无显著差异。【结论】本研究证明在甜菜夜蛾Top I中引入V420I,L530P和A653T突变后,其对底物p BR322的解旋活性显著降低,为后期探索甜菜夜蛾Top I的定点突变与其对喜树碱及其衍生物敏感性的关系奠定了基础。

分类号： Q78`S433.4

  • 相关文献

[1]甜菜夜蛾拓扑异构酶Ⅰ氨基酸突变对其DNA解旋活性的影响. 张兰,张燕宁,贾伟,蒋红云. 2015

[2]口蹄疫病毒VP1结构蛋白多个氨基酸的替换对病毒生物学特性和小鼠免疫保护的影响. 黄书伦,龚婷,孙普,白兴文,马雪青,袁红,李坤,卢曾军,刘在新,李平花. 2021

[3]口蹄疫O型重组病毒的构建及其生物学特性分析. 龚婷,李平花,孙普,马雪青,白兴文,杨孝朴,卢曾军,曾巧英,刘在新. 2019

[4]杂草对ALS抑制剂抗药性概述. 黄兆峰,刘倩,王园园,姜翠兰,周欣欣. 2019

[5]豹纹综合征研究进展. 余时娟. 2017

[6]氨肽酶N(APN)与鳞翅目昆虫对Bt抗性的关系. 苗素丽,张少平,程红梅. 2008

[7]EMS诱变后甘蓝型油菜植株性状、种子粒重与含油量变异分析. 陈碧云,吕培军,张天瑶,许鲲,伍晓明. 2016

[8]苏云金芽胞杆菌spoⅢD基因缺失突变株的特点. 束长龙,张杰,黄大昉,宋福平. 2009

[9]三疆地区1955-2009年气温、降水变化特征的时间序列分析. 马建勇,潘婕,姜江,闫彩霞,许吟隆. 2012

[10]猪肌肉生长抑制素(MSTN)前肽定点突变载体的构建及其原核表达. 姜声旺,张晓玮,王在贵,崔文涛,李奎. 2012

[11]新色型突变棕色貉毛色遗传初探. 佟煜仁,朴厚坤. 2009

[12]哺乳动物性晚熟相关基因的研究进展. 冯涛,狄冉,储明星,张英杰. 2009

[13]λpL/pR-cI857温控系统的改造及其对大肠杆菌菌蜕制备的影响. 董洪亮,于圣青,韩先干,白灏,何亮. 2012

[14]应用重组抗原建立检测牛传染性胸膜肺炎的间接ELISA方法. 辛九庆,高玉龙,李媛,王砚范,钱爱东. 2006

[15]北疆地区1955—2009年气温、降水变化特征的时间序列分析. 马建勇,潘婕,姜江,闫彩霞,许吟隆. 2012

[16]乙型脑炎病毒NS1'蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响. 郭亦非,郑浩,郑旭晨,童武,刘飞,梁超,单同领,于海,童光志. 2014

[17]番鸭细小病毒鹅胚化弱毒株FZ91-30的全基因组克隆及序列分析. 王建业,黄钰,龚建森,蒋志伟,朱国强. 2015

[18]美洲水貂TYR基因变异与毛色相关性分析. 邢思远,杨童奥,郭强,杨福合. 2015

[19]大豆MYB转录因子GmMYBZ2的鉴定、突变分析及原核表达. 杜海,刘蕾,唐晓凤,赵艳丽,高杰,吴燕民,黄玉碧,唐益雄. 2009

[20]基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白茎区居间序列突变株的拯救及其生物学特性的分析. 刘彬,吉艳红,林中青,朱启运. 2014

作者其他论文 更多>>