文献类型： 中文期刊
作者： 韩露;渠可心;傅永福;陈庆山;武小霞;张晓玫
作者机构：
关键词： 大豆;WUS基因;CRISPR/Cas9;根瘤发育
期刊名称：中国油料作物学报
ISSN： 1007-9084
年卷期： 2022 年 2 期
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）
摘要： 豆科植物的结瘤固氮作用在农业上具有减肥增效、改良土壤等重大意义.WUS基因在植物分生组织中具有重要作用.基于已公布的大豆基因组数据对该基因进行生物信息学分析,表明大豆WUS基因(GmWUS)和模式植物拟南芥WUS基因(AtWUS)的编码蛋白在氨基酸序列上相似度较高,但在酸性区域存在较大差异.从大豆品种天隆1号基因组中扩增获得GmWUS2基因转录起始位点上游3000 bp的启动子序列GmWUS2pro,并将其与报告基因GUS相连以获得GmWUS2pro:GUS表达载体.qRT-PCR分析发现GmWUS2基因主要在大豆的花和根瘤中表达.通过发根转化和GUS染色,发现该基因启动子在大豆的根和根瘤中都有活性.利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和发根农杆菌的转化技术构建GmWUS2基因的敲除载体,同时还构建过表达GmWUS2基因载体.将构建的敲除载体和过表达载体分别导入大豆发根中,并接种根瘤菌.观察统计Gmwus2突变体发根植株和GmWUS2基因的过表达发根植株与导入空载体的对照发根植株的表型差异,发现GmWUS2基因对根瘤及叶片发育具有明显的抑制作用.本研究的初步结果说明WUS基因在根瘤发育中具有重要作用,可为大豆根和结瘤发育机制的研究提供有益线索,并为在农业生产上提高生物固氮提供潜在的新方法.
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