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PMAxx-qPCR定量检测梨火疫活菌方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 韩文超;许景升;黄宏坤;李志明;杨晓欣;徐进;冯洁

作者机构：

关键词： 梨火疫病;PMAxx-qPCR检测技术;活菌检测

期刊名称：植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2025 年 51 卷 04 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 本研究将改良的叠氮溴化丙锭(PMAxx)与荧光实时定量PCR技术(qPCR)相结合，开发出一种精准高效、灵敏特异的PMAxx-qPCR检测方法，用于梨火疫病菌Erwinia amylovora活细胞的定量检测。通过控制变量的单因素变化试验对PMAxx预处理体系中的各项参数进行优化，确立了PMAxx终浓度为15μmol/L,黑暗孵育时间为15 min,曝光时间为8 min的PMAxx预处理体系，可有效抑制1.0×10～8 cfu/mL梨火疫死菌的DNA扩增，对梨火疫活菌DNA的扩增无影响。本文开发的PMAxx-qPCR检测技术可于特定范围内有效地排除死菌干扰，适用于菌液浓度在10～3～10～8 cfu/mL范围内的活菌数精准定量。为进一步深入探究梨火疫病的流行规律提供新的技术支持，并有效防止在实际样本的PCR检测中出现假阳性的现象。

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  • 相关文献

[1]PMA-qPCR定量检测青枯菌活菌方法的建立. 王帅,徐进,许景升,张昊,冯洁. 2018

[2]梨火疫病菌操纵子全序列的扩增和克隆. 刘华威,王晓鸣. 2010

[3]梨种质对梨火疫病的抗性研究. 刘华威,王晓鸣,郭庆元,韩丽娟,曹玉芬,张薇,田路明. 2008

[4]梨火疫病菌的RPA快速检测技术的研发. 蒲姝旸,张瑾逸,暴晓阳,孟青青,田茜,蔡璐璐,赵文军. 2024

[5]红树林沉积物生防芽孢杆菌资源筛选及防效评价. 高雅,王美红,杨凤环,刘国红,余超,陈华民. 2025

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