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中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 孟庆玲;才学鹏;乔军;景志忠;张艳;田广孚;郭爱疆

作者机构：

关键词： 白细胞介素-10基因;表达;抗体制备

期刊名称：中国实验动物学报

ISSN： 1005-4847

年卷期： 2007 年 15 卷 03 期

页码： 203-207

收录情况： CSCD

摘要： 目的克隆并表达中国白兔IL-10基因,制备抗IL-10多克隆抗体。方法运用RT-PCR对从ConA诱导后的中国白兔外周血单核细胞(PMBCr)总RNA中扩增IL-10基因,克隆后进行测序和遗传进化分析,同时将其亚克隆pET28a中,在大肠杆菌中诱导表达,并用纯化的表达产物制备多克隆抗体。结果该基因全长537 bp,编码178个氨基酸。与欧洲兔IL-10基因同源性很高,但与鼠、鸡、河豚和斑马鱼等不同物种IL-10基因差异较大。经IPTG诱导后,重组菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量为23.4×103的重组蛋白。Western blot分析表明,中国白兔IL-10基因已经表达。重组表达的蛋白量可占菌体蛋白的15.2%。结论成功实现了中国白兔IL-10的原核表达,制备了小鼠抗兔IL-10的多克隆抗体。

分类号： S852.4

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