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微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫SYBR Green real time PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李安平;黄克和;王权;朱志宏;曹积生;巩新民;杨国柱

作者机构：

关键词： 实时荧光定量聚合酶链式反应;SYBR Green;微小隐孢子虫;安氏隐孢子虫

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2009 年 39 卷 06 期

页码： 510-515

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中登录的隐孢子虫小亚基rRNA基因序列设计1对引物,并以标准基因组DNA为模板,初步建立了检测乳牛微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫的SYBR Green real time PCR方法,并对乳牛微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫阳性样品和上海40份乳牛粪便进行了检测。结果表明,此次建立的real timePCR对微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫均能扩增出曲线,且其他寄生虫(鸡贝氏隐孢子虫、刚地弓形虫、犬新孢子虫)和大肠杆菌均未检测到;标准基因组DNA的检测阈值达到5个拷贝,牛粪中卵囊的最低检测量为每克粪便5个卵囊,乳牛粪便阳性率为15%(6/40)。表明,建立的荧光定量PCR快速、特异、敏感,可用于乳牛隐孢子虫病的流行病学调查。

分类号： S854.43

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