DINH与sC3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达
文献类型: 中文期刊
作者: 岳耀敬;焦硕;郭宪;冯瑞林
作者机构:
关键词: 绵羊;补体C3d基因;抑制素;真核分泌表达
期刊名称:中国生物工程杂志
ISSN: 1671-8135
年卷期: 2008 年 S1 期
页码: 21-26
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的:构建DINH和sC3d3融合分泌型真核表达载体,并在BHK-21细胞中表达。方法:采用RT-PCR技术扩增绵羊补体C3d基因片段,将该片段插入到pMD18-T载体,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA-DPPIS-DINH-mC3d3构建pcDNA-DPPIS-DINH-sC3d3。pcDNA-DPPIS-DINHsC3d3脂质体法转染BHK-21细胞,Western blotting鉴定DINH-sC3d3融合蛋白。结果:酶切及测序结果显示,pcDNA-DPPIS-DINH-sC3d3构建正确;在BHK-21细胞中成功地获得了DINH-sC3d3融合蛋白的高效表达。结论:构建的抑制素基因疫苗可在真核细胞内正确表达,这为进一步的动物实验打下了基础。
分类号: S852.23`Q786
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