7种动物冠状病毒特异基因的克隆与序列分析
文献类型: 中文期刊
作者: 李健;王巧全;陈沁;王权;张建武;熊炜;胡永强
作者机构:
关键词: 冠状病毒;基因;克隆;序列分析
期刊名称:畜牧与兽医
ISSN: 0529-5130
年卷期: 2008 年 40 卷 02 期
页码: 12-15
收录情况: 北大核心
摘要: 为了比较冠状病毒基因相关性,获得特异基因克隆制备冠状病毒基因芯片,根据发布的基因序列,每种病毒设计4~17对引物,利用火鸡冠状病毒(TCV)原毒和蔗糖密度梯度离心纯化浓缩的犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)、牛冠状病毒(BCV)细胞毒,提取总RNA并反转录和PCR扩增。回收PCR产物连接pGEM-T-easy载体并转化大肠杆菌TGI,经PCR鉴定后测序。将所有基因片段的核苷酸序列和推导的氨基酸序列,分别与GenBank有关病毒相关基因片段的核苷酸序列进行分析比较,确定它们的同源性。通过对不同冠状病毒不同基因片段的克隆和测序,发现同一群冠状病毒核苷酸序列间具有较高的同源性。
分类号: S852.65
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