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猪小肠上皮细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 徐天;石达;陈建飞;谷凤丽;时洪艳;张鑫;冯力

作者机构:

关键词: 猪腹泻病毒;猪小肠上皮细胞;酵母双杂交;cDNA文库

期刊名称:中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2014 年 41 卷 10 期

页码: 40-44

收录情况: 北大核心

摘要: 为了更系统的研究病毒在猪肠道内侵入及致病的分子机制,本试验以猪小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)为模型,应用RNeasy Min Kit从猪IEC中提取细胞总RNA,反转录后,利用SMART技术合成双链cDNA(ds-cDNA),通过同源重组的方法构建猪IEC酵母双杂交cDNA文库。结果显示,文库的滴度为8.4×108 CFU/mL,插入的ds-cDNA片段大小为0.5~2.0kb,平均长度约为1.1kb,文库重组率为100%。此文库为筛选与猪腹泻病毒相互作用的宿主蛋白及进一步阐明病毒的致病机制奠定了基础,为研制有效的药物或疫苗提供了依据。

分类号: Q78

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