文献类型： 中文期刊
作者： 沈旦枫;王睿;郭佃磊;霍琳琳;刘永刚;郭龙军;王玉娥;李曦
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒;原核表达;猪源化重组抗体
期刊名称：中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2017 年 39 卷 3 期
页码： 220-224
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）
摘要： 为制备与猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)具有反应活性的猪源化原核表达抗体(Pr Ab),本实验通过流式细胞技术,以PRRSV GP5蛋白多肽及抗猪Ig G抗体,筛选出能够与PRRSV抗原表位结合的阳性B淋巴细胞,利用RT-PCR从筛选得到的B细胞的mRNA中扩增出编码抗体重链可变区(VH)基因序列和轻链可变区(VL)基因序列,将扩增的可变区基因序列分别与本实验室前期克隆的猪源抗体轻链恒定区(CL)和重链恒定区(CH)基因序列连接后,以Linker序列将轻链和重链全长基因序列相连,构建全长的猪源抗体编码基因(H-linker-L)。将该基因克隆于原核表达载体p ET-28a中进行原核表达及纯化。Western blot鉴定结果显示,表达的重组蛋白能够被抗猪IgG抗体所识别,表明表达的重组蛋白为PrAb;经PRRSV包被的ELISA鉴定,PrAb与PRRSV弱毒株CH1R和强毒株HuN4呈阳性反应,表明所制备的PrAb为PRRSV特异性抗体。本实验为进一步制备诊断PRRS的猪源化重组抗体奠定了基础。
分类号： S852.65
- 相关文献
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA刺激下NLRP3与DDX19A共定位的研究. 王胜男,刘园园,胡亮,李江南,翁长江. 2016
[2]PRRSV强弱病毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定. 吕健,韦祖樟,高飞,郑海红,童光志,袁世山. 2013
[3]猪caspase-1 p20多克隆抗体制备及其在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染中的初步应用. 刘园园,李江南,刘琴芳,张枫,张利杰,黄丽,穆杨,翁长江. 2014
[4]猪caspase-1p20多克隆抗体制备及其在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染中的初步应用. 刘园园,李江南,刘琴芳,张枫,张利杰,黄丽,穆杨,翁长江. 2014
[5]猪FcγRⅢ双抗体夹心ELISA方法的建立及其在PRRSV感染猪中的初步应用. 谷伟红,郭龙军,牛军伟,田志军,冯力,王玉娥. 2016
[6]猪FcγRIII双抗体夹心ELISA方法的建立及其在PRRSV感染猪中的初步应用. 谷伟红,王玉娥. 2015
[7]非结构蛋白2高变区在PRRSV复制中的作用. 吕健,韦祖樟,高飞,郑海红,童光志. 2012
[8]天津地区猪繁殖与呼吸综合征流行毒株ORF5基因的克隆及遗传变异分析. 李文忠,荣新利,刘野,吴庆东,张乐,孙英峰,于海. 2023
[9]单核细胞增生李斯特菌新型内化素lmo0549的分子特征及其表达. 王立霞,孟庆玲,乔军,郭晶,伍晔晖,才学鹏,蔡扩军,王登峰. 2019
[10]小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军. 2019
[11]棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克隆、原核表达及表达谱分析. 井维霞,黄欣蒸,刘丹凤,张强,寇俊凤,曲爱军,张永军,郭予元. 2017
[12]蛋白激发子Hrip1互作蛋白的筛选及其原核表达. 李书鹏,杨秀芬,袁京京,邱德文. 2017
[13]二化螟APN1的原核表达及其与Cry2Aa蛋白的结合特性研究. 刘慧,李博,牛林,邱林,王永. 2018
[14]家蚕微孢子虫己糖激酶基因的克隆及序列结构分析和原核表达. 陈红丽,彭祥然,李孝良,Bismark Kyei,尚瑞沙,齐静茹,张轶岭,徐莉,沈中元. 2018
[15]豆科凝集素基因Le4的克隆及其表达产物对蚜虫的抗性. 周英,谢红卫,刘长爱,况琼,潘境涛. 2016
[16]油菜乙酰乳酸合酶基因BnALS3的亚细胞定位、原核表达及其酶活分析. 胡茂龙,龙卫华,高建芹,陈锋,周晓婴,张维,陈松,张洁夫,浦惠明. 2018
[17]猪环鸟苷酸-腺苷酸合成酶cGAS基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析. 龙朝琳,何小兵,陈国华,贾怀杰,王国蒨,房永祥,景志忠. 2019
[18]犬瘟热病毒截短P蛋白的表达及纯化. 李爽,易立,程悦宁,曹智刚,林鹏,程世鹏. 2019
[19]禽腺病毒4型Fiber2蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备. 郭浩然,贾艳娥,吉艳红,李郁. 2019
[20]抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体的制备及初步临床应用. 杨溢,杨玮枫,张东,孟霞,潘夏雨,袁天梅,朱春红,朱国强. 2018
作者其他论文 更多>>
-
感染性动物实验的福利与伦理特殊要求
作者：闵凡贵;富宏坤;刘永刚;刘香梅;刘忠华;李垚;陶雨风
关键词：感染性动物实验;福利;伦理;人道终点
-
巴马香猪不同生长阶段肠道微生物的变化
作者：卫孟瑶;李发亮;莫家远;刘永刚;李步高;黄雷;李奎
关键词：（1-1-2）粪便;微生物;生长发育;巴马香猪
-
两种促生菌对烟草生长和根际土壤细菌群落的影响
作者：王睿;师晶;姚涛;孙文秀;曹毅;张成省
关键词：促生菌;根际土壤酶活性;细菌多样性;细菌群落功能;烟草
-
稳定表达ATP5a细胞系的建立
作者：闫浩鑫;李明蔚;吴洋;郭龙军;冯力
关键词：ATP5a;细胞系;稳定表达;IPI-2I
-
SPF鸡的主要垂直传播性病原体及其检测标准分析
作者：王梦杰;马文杰;潘喻;陈见兴;张贺;夏长友;王玉娥
关键词：SPF鸡;垂直传播;病原检测
-
预扩增qPCR技术检测少量猪早期胚胎细胞基因表达的研究
作者：晏超;刘永刚;谢浩;彭翠婷;张才用;赵玉兰;齐霖;陈指龙;唐中林
关键词：（1-1-1）预扩增;qPCR;猪早期胚胎;微量细胞;基因表达
-
Mstn基因敲除小鼠肌肉和C2C12细胞的转录特征分析
作者：景新阳;莫家远;王楠;刘永刚;牟玉莲;林鑫;黄雷;朱振东;李奎
关键词：小鼠(Mus musculus);C2C12细胞;Mstn基因;骨骼肌;脂质代谢