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蛋白激发子Hrip1互作蛋白的筛选及其原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李书鹏;杨秀芬;袁京京;邱德文

作者机构：

关键词： 蛋白激发子;互作蛋白;酵母双杂交;原核表达

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2017 年 6 期

页码： 182-189

摘要： 蛋白激发子Hrip1是从极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)中分离纯化出的一种新型超敏反应诱导蛋白,能激发烟草、拟南芥和水稻等多种植物的免疫防御反应,提高广谱抗病性。为了探究Hrip1诱导植物抗性反应的分子机制,以Hrip1为诱饵蛋白,通过酵母双杂交,在水稻c DNA文库中筛选Hrip1的互作蛋白。经回转验证和x-a-gal染色得到了一个Hrip1互作蛋白-CSN5。构建了互作蛋白CSN5的原核表达载体pGEX-6P-2-CSN5,并转化大肠杆菌表达菌株BL21。经IPTG诱导后获得了可溶性的融合表达蛋白,用GST亲和层析柱纯化获得单一条带的融合表达蛋白,并用Western blot鉴定了融合表达蛋白的正确性。研究结果为进一步鉴定Hrip1的互作蛋白及其功能奠定了基础。

分类号： Q943.2`S432.2

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