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少孢节丛孢菌新疆分离株几丁质酶AO-14基因的克隆表达

文献类型： 中文期刊

作者： 钟文强;孟庆玲;乔军;陈英;贡莎莎;才学鹏

作者机构：

关键词： 少孢节丛孢菌;几丁质酶;AO-14基因;克隆;序列分析;原核表达

期刊名称：畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2017 年 49 卷 11 期

页码： 118-123

收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 利用RT-PCR扩增获得少孢节丛孢菌新疆分离株XJ-A1几丁质酶AO-14目的基因片段,对该基因进行克隆和分子特征分析;构建重组表达质粒p ET32a-AO14,转化到大肠杆菌进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot分析表达的重组蛋白。结果表明,AO-14基因c DNA全长为1 200 bp,编码399个氨基酸;编码蛋白几丁质酶AO-14属于糖苷水解酶18家族,具有典型的几丁质酶催化区保守序列SXGG和DGXDXDWE,氨基酸序列的第131~139为活性位点所在区域,无信号肽序列。SDS-PAGE分析结果显示,AO-14表达产物的分子质量约为60 ku;Western-blot分析结果表明,重组蛋白可以与抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生反应,证实在大肠杆菌中实现了少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-14基因的表达,为进一步研究少孢节丛孢菌几丁质酶AO-14生物学功能奠定了基础。

分类号： S855.9

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