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羽衣甘蓝ARC1的抗体制备及蛋白表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 李晓屿;王秋红;李玉花;蓝兴国

作者机构：

关键词： 羽衣甘蓝;自交不亲和;ARC1;抗体制备;蛋白表达

期刊名称：园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2017 年 44 卷 2 期

页码： 355-363

摘要： ARC1是芸薹属植物自交不亲和(Self-incompatibility,SI)信号复合体下游传递因子,特异性地介导SI信号传递。利用原核表达系统对羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)ARC1的全长蛋白(1~663 aa,BoARC1-F)、UND结构域蛋白(1~279 aa,BoARC1-N)和ARM结构域蛋白(361~663aa,BoARC1-C)进行重组表达。SDS-PAGE结果显示这3种蛋白分别在分子量68、33和38 kD处特异性地诱导表达。利用Ni~(2+)-NTA树脂亲和层析技术获得重组蛋白。将BoARC1-C蛋白免疫小鼠并通过细胞融合技术制备单克隆抗体,获得2株单克隆抗体。交叉反应试验结果显示制备的单克隆抗体具有ARC1识别特异性。通过免疫印迹技术检测BoARC1在不同组织和不同发育阶段柱头中的表达,结果显示BoARC1特异性地在羽衣甘蓝柱头中表达,而且在开花阶段的柱头表达量最高。

分类号： S681.9

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