转cry1Aa基因抗虫棉整合结构解析及转化体特异性检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 王叶;谢家建;黄春蒙;彭于发
作者机构:
关键词: 转基因棉花;NN6转化体;cry1Aa基因;定性PCR;定量PCR
期刊名称:棉花学报
ISSN: 1002-7807
年卷期: 2017 年 4 期
页码: 307-315
摘要: 【目的】cry1Aa基因是2011年本实验室在我国棉花商品种子中发现的1种未经批准的转基因成分,本研究旨在通过整合结构解析,建立特异性检测方法,对市售棉种进行初测,明确该外源基因在我国棉种中的存在情况。【方法】通过Genome walking、长链PCR分离获得了转cry1Aa基因棉花转化体(定名为NN6转化体,简称NN6)的外源基因整合结构,同时基于插入位点基因组及外源DNA连接区,建立了NN6转化体特异性的定性聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法和实时荧光定量PCR方法。【结果】NN6整合结构主要包括cry1Aa、aad和Npt II基因,插入棉花基因组7号染色体37 169 450位,产生91 bp基因组缺失;所构建的定性PCR检测方法能特异、快速地对棉花单株和种子单粒中NN6转化体的纯/杂合状态进行鉴定,实时荧光定量PCR检测限为44拷贝,能满足国内外对转基因标识的需要;对含有cry1Aa基因的3个市售棉种进行检测,其纯合度分别为1.51%,5.21%和21.09%。【结论】本研究解析了NN6的整合结构,并建立特异性检测方法,为我国转基因棉花新品种选育及转基因安全管理提供技术手段。
分类号: S562
- 相关文献
[1]转基因棉花MON757转化体特异性PCR检测方法及应用. 王叶,范金杰,谢家建,彭于发. 2016
[2]转基因抗虫棉中cry1Aa基因表达盒的序列测定和检测. 谢家建,范荫荫,李蕊,彭于发. 2011
[3]转基因玉米双抗12-5转化体特异性PCR方法验证结果分析. 王颢潜,肖芳,杨蕾,缪青梅,张旭冬,张秀杰. 2020
[4]对鳞翅目害虫高毒力的Bt cry1Aa基因的分离克隆及表达. 张杰,陈中义,宋福平,李长友,胡玉琴,黄大昉. 2003
[5]对鳞翅目害虫高毒力的Btcry1Aa基因的分离克隆及表达. 张杰,陈中义,宋福平,李长友,胡玉琴,黄大昉. 2003
[6]转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究. 聂淑晶,武玉花,吴刚,肖玲,卢长明. 2008
[7]多聚酶对转基因产品PCR检测的影响分析. 夏玉平,吴刚,武玉花,张丽,卢长明. 2010
[8]转基因玉米MON88017转化事件特异性定性PCR检测方法及其标准化. 瞿勇,武玉花,吴刚,曹应龙,卢长明. 2010
[9]植酸酶基因定性PCR检测方法及阳性质粒分子的构建. 李俊,刘信,曹应龙,武玉花,厉建萌,吴刚,张丽,卢长明. 2012
[10]转基因耐除草剂玉米MON87419品系特异性定性PCR检测方法的建立. 李凌燕,肖冰,张旭冬,陈子言,王颢潜,张秀杰,陈红,梁晋刚. 2023
[11]转基因玉米MON87419实时荧光PCR定性检测方法的建立. 李凌燕,肖冰,王颢潜,乌兰,邓志峰,陈红,梁晋刚. 2023
[12]抗逆大豆IND-ØØ41Ø-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化. 肖芳,,李允静,,武玉花,,高鸿飞,,翟杉杉,,吴刚,,梁晋刚. 2023
[13]不同再生水灌溉方式对土壤-辣椒系统中细菌群落多样性及病原菌丰度的影响. 崔丙健,高峰,胡超,李中阳,樊向阳,崔二苹. 2019
[14]异育银鲫养殖环境典型病原微生物检测和细菌群落解析. 崔丙健,高天明,陈琳. 2019
[15]生物炭对非常规水源灌溉下土壤-作物病原菌的影响. 崔二苹,崔丙健,刘源,高峰,樊向阳,李中阳. 2020
[16]利用转录组及iTRAQ技术筛选高油酸油菜抗病相关基因. 张振乾,肖钢,官春云,邬贤梦,熊兴华,李云昌,胡琼,陈社员. 2015
[17]应用抑制性消减杂交技术从枳中筛选根特异表达基因. 姚利晓,何永睿,许兰珍,雷天刚,彭爱红,邹修平,陈善春. 2014
[18]穿山龙薯蓣皂甙次生代谢合成相关新基因的克隆和分析. 苟兴华,何明雄,孙雁霞,王跃华,苟小军. 2010
[19]应用RNA干扰技术对甜菜夜蛾信息素结合蛋白功能的研究. 周耀振,修伟明,董双林. 2009
[20]谷胱甘肽促进牛体外受精胚胎发育的转录组初探. 于学颖,郭芹芹,郝海生,孙尉峻,赵学明,朱化彬,杨凌,杜卫华. 2016
作者其他论文 更多>>
-
玉米田四种禾本科杂草对草甘膦的敏感性测定
作者:马振杰;谢家建;李香菊;于惠林
关键词:草甘膦;禾本科杂草;敏感性
-
玉米田两种阔叶杂草苍耳和藜对草铵膦敏感性测定
作者:贾芳;陈景超;崔海兰;李香菊;谢家建;于惠林
关键词:草铵膦;藜;苍耳;敏感性
-
一种优化的大螟人工饲料
作者:张洪涛;韩兰芝;彭于发
关键词:大螟;人工饲料;茭白;饲养效果
-
转cry1Ab+cry1C双价抗虫水稻对二化螟的抗性评价
作者:陈耕;何珊;韩兰芝;彭于发
关键词:二化螟;转基因抗虫水稻;抗虫效率;杀虫蛋白表达
-
利用嫩玉米穗饲养大螟的技术
作者:唐辉;陈法军;韩兰芝;彭于发
关键词:大螟;嫩玉米穗;饲养技术;饲养效果
-
转cry1C,cry2A基因水稻对稻田浮游动物群落物种多样性的影响
作者:陈怡;杨艳;朱昊俊;高彦杰;陈秀萍;彭于发
关键词:转基因水稻;浮游动物;物种多样性;安全评价
-
二化螟Cry1Ac汰选品系对不同Bt蛋白的敏感性
作者:何珊;徐杨洋;韩兰芝;贾变桃;彭于发
关键词:二化螟;Cry1Ac汰选品系;Bt杀虫蛋白;敏感性变化