基于酶热稳定性系统计算的乳酸氧化酶热稳定性改造
文献类型: 中文期刊
作者: 华晨;李新新;涂涛;杨虹;罗会颖;陈家明;姚斌;柏映国;彭书传
作者机构:
关键词: 乳酸氧化酶;热稳定性;分子改造;ETSS
期刊名称:生物技术通报
ISSN: 1002-5464
年卷期: 2018 年 8 期
页码: 144-150
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 乳酸氧化酶能够催化乳酸氧化为丙酮酸,具有重要的工业应用价值,但已有研究表明,不同来源的乳酸氧化酶均存在热稳定性不好的问题,影响了其在工业当中的应用。目前对于乳酸氧化酶的研究报道较少,对其热稳定性的改造更未见报道,因此提高乳酸氧化酶的热稳定性具有重要意义。克隆表达了一个高比活乳酸氧化酶(Eg LOD),通过生物信息学辅助分析及表面电荷分析软件(ETSS)对乳酸氧化酶的蛋白结构进行理性分析,基于蛋白表面电荷分布优化设计了9个突变体尝试对其进行热稳定性改良。通过对突变体的筛选获得了两个有效提升热稳定性的突变体D250N,D281N,在60℃下处理30 min仍然能够保持50%以上的酶活,而野生型Eg LOD酶活仅剩20%左右。
分类号: Q55
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