数字农科院2.0

家蚕微孢子虫己糖激酶基因的克隆及序列结构分析和原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 陈红丽;彭祥然;李孝良;Bismark Kyei;尚瑞沙;齐静茹;张轶岭;徐莉;沈中元

作者机构：

关键词： 家蚕微孢子虫;己糖激酶;基因克隆;序列特征;原核表达

期刊名称：蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2018 年 1 期

页码： 70-76

摘要： 己糖激酶(hexokinase,HXK)是糖酵解途径的限速酶,在能量代谢中充当极其重要的角色。家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)具有完整的糖酵解途径,其基因组中有2个序列相似度较高的己糖激酶编码基因拷贝(NBO_1320g0001,NBO_27g0008)。根据其中的一个基因拷贝(NBO_27g0008)序列设计特异性引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板成功克隆了该基因,命名为Nb HXK-1。该基因大小为894 bp,包含完整的ORF,编码297个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为34.241 k D,等电点(p I)为5.26,蛋白质的氨基酸序列有31个磷酸化位点和4个潜在的N-糖基化位点,无跨膜结构域,有信号肽,二级结构主要由α螺旋(54.55%)、延伸片段(17.80%)和无规则卷曲(27.61%)组成。系统进化分析显示Nb HXK-1与东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)己糖激酶(Nc HXK)氨基酸序列的亲缘关系较近。将Nb HXK-1基因插入原核表达载体p ET-28a(+)并转化BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达后经蛋白质串联质谱鉴定和Western blot分析显示,获得了与预期大小一致的约35 k D的重组Nb HXK-1蛋白,为进一步阐明Nb HXK-1的生物学功能奠定了基础。

分类号： S884.6

  • 相关文献

[1]家蚕微孢子虫海藻糖酶(Trehalase)基因的生物信息学分析及原核表达和多克隆抗体制备. 李孝良,彭祥然,陈功,戴卫江,唐旭东. 2016

[2]家蚕微孢子虫烯醇化酶(Enolase)基因的克隆及序列分析与原核表达. 彭祥然,李孝良,陈功,戴卫江,李楠. 2016

[3]桑树转录因子CBF1基因的克隆及序列特征与低温应激表达. 张林,刘晓格,方荣俊,潘刚,刘利. 2013

[4]家蚕微孢子虫丙酮酸激酶基因的克隆与表达特征分析. 张志林,齐静茹,尚瑞沙,陈红丽,张轶岭,沈中元. 2019

[5]家蚕微孢子虫假定层粘连蛋白基因NbHLAMB4的克隆和序列分析及互作蛋白质筛选. 李楠,戴卫江,李孝良,彭祥然,唐旭东. 2016

[6]家蚕微孢子虫水通道蛋白基因NbAQP的克隆及表达特征分析. 王玮,陈功,彭祥然,李孝良,唐旭东. 2016

[7]桑树MaGH3.6基因的克隆与诱导表达及时间特异性. 张晓峰,焦锋,聂浩,刘明鲁,程嘉翎. 2013

[8]猪伪狂犬病毒JS-2012流行毒株主要免疫原性蛋白的序列分析及其原核表达载体的构建. 刘飞,童武,郑浩,梁超,杨莘,周艳君,童光志. 2014

[9]桑树MaSAUR2基因的克隆、序列特征及时间特异性表达. 李小玉,张晓峰,杜伟,聂浩,唐壮,班月圆,杜小龙,程嘉翎. 2014

[10]桑树翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)基因的克隆及其在温度胁迫下的表达变化. 雷朋,何庆玲,贺芳,吴琼英,潘刚. 2015

[11]蓖麻蚕AGO1蛋白基因的克隆及序列与表达特征. 何庆玲,张月华,钱荷英,罗旭芳,李刚. 2014

[12]家蚕碱性丝氨酸蛋白酶基因Asp的克隆及在不同耐氟性家蚕组织中的表达差异. 张华光,吴萍,徐安英,钱荷英,张月华. 2013

[13]蓖麻蚕乙酰胆碱酯酶基因Pcrace2的克隆及序列与表达分析. 刘娟,张月华,张华光,高丽,钱荷英. 2013

[14]桑树Ca~(2+)/H~+反向转运体基因MCAX-1的克隆及序列与表达分析. 刘赵越,童伟,张英华,方荣俊,赵卫国,李龙. 2012

[15]棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克隆、原核表达及表达谱分析. 井维霞,黄欣蒸,刘丹凤,张强,寇俊凤,曲爱军,张永军,郭予元. 2017

[16]斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型分离株ORF63基因的序列特征及表达与启动子活性分析. 刘惠芬,,高绘菊,,王石宝,,江峰,,李轶女,,张志芳,,牟志美. 2012

[17]西瓜接穗对嫁接苗根系糖代谢及生长发育的影响. 赵加欣,张静亚,尚庆茂,谢露露,董春娟. 2020

[18]茶树己糖激酶基因CsHXK2的启动子克隆及表达特性分析. 李娜娜,刘莹,张豪杰,王璐,郝心愿,张伟富,王玉春,熊飞,杨亚军,王新超. 2020

[19]紫茎泽兰类黄酮3′-羟化酶基因的克隆、序列分析和原核表达. 程红梅,郭建英,高必达,万方浩. 2007

[20]绵羊痘病毒古浪县分离株H7R基因的克隆及其原核表达. 吴健,朱海霞,赵银龙,吴国华,赵志荀. 2016

作者其他论文 更多>>