鞘氨醇胞菌B1咔唑降解基因carB的克隆与功能研究
文献类型: 中文期刊
作者: 边晨凯;张宇;陈度宇;王森;许雷
作者机构:
关键词: 咔唑;鞘氨醇胞菌;降解基因;酶学性质
期刊名称:中国农业科技导报
ISSN: 1008-0864
年卷期: 2018 年 2 期
页码: 56-64
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 以分离到的咔唑高效降解菌鞘氨醇胞菌B1为材料,研究该菌株咔唑降解基因簇的组成和表达模式,阐释咔唑降解过程中关键酶的作用机理。通过分析不同菌株咔唑降解基因簇中基因的保守区,从菌株B1中成功克隆得到基因簇中car Aa、car Ba、car Bb和car C基因片段。通过RT-PCR证实菌株B1的咔唑降解基因簇为诱导表达。通过同源克隆得到降解关键基因car B和编码两个亚基的car Ba、car Bb基因,并在大肠杆菌中进行了异源表达。以2,3-二羟基联苯为底物,对Car B粗酶液进行了酶学性质分析。研究表明Car B蛋白催化最适p H和温度分别为7.4和30℃,Fe2+能显著提高酶的催化活力。
分类号: Q78`X172
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