文献类型： 中文期刊
作者： 相笑;张彦兵;石元元;李玉明;刘珂;魏建超;邵东华;李蓓蓓;童光志;马志永;邱亚峰
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;核衣壳蛋白;抗原肽;抗体
期刊名称：中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2018 年 1 期
页码： 19-24
收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）
摘要： 基于生物信息学、化学合成技术和免疫学技术,利用预测的抗原肽进行抗体的制备已被广泛地应用。本研究探讨了利用预测的抗原肽制备针对PRRSV N蛋白的特异性抗体。首先,利用生物学软件对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白进行抗原性预测,获得一个位于蛋白N端16个氨基酸的候选抗原肽。通过BLAST比对,发现该抗原肽在不同北美型毒株中高度保守。其次,采用Fmoc固相法进行抗原肽合成,并将合成的抗原肽通过MBS法偶联到KLH载体蛋白上。随后,将偶联好的抗原肽与弗氏完全佐剂或不完全佐剂混合,免疫新西兰大白兔,制备抗血清,并利用IgG亲和层析的方法纯化抗体。最后,利用ELISA、Western blot和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)对抗体的特异性进行检测,结果显示,利用偶联好的抗原肽包被ELISA板,检测抗体的滴度,纯化抗体的滴度超过10~5;Western blot结果显示,该抗体(1∶2000)可以特异地识别PRRSV感染的Marc145细胞中的N蛋白,重要的是该抗体可以与不同毒株反应;IFA检测显示,该纯化的抗体(1∶100)可以检测PRRSV感染的细胞。因此,利用生物信息学软件预测的PRRSV N蛋白的抗原肽,能有效地应用于抗PRRSV N蛋白抗体的制备,制备的抗体不仅为研究PRRSV N蛋白奠定基础,而且为研究PRRSV与细胞相互作用提供了一个有效的工具。
分类号： S852.651
- 相关文献
[1]高致病性PRRSV JL-04/12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析. 王凤雪,刘莹,杨勇,朱洪伟,孙娜,刘杏,程世鹏,温永俊. 2015
[2]表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建. 智海东,王云峰,张晶,王玫,刘娣,童光志. 2007
[3]猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白单克隆抗体的制备. 周艳君,薛强,安同庆,仇华吉,童光志,王云峰,田志军,王玫,蔡雪辉. 2005
[4]表达猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白重组禽痘病毒的构建. 智海东,王云峰,张晶,童光志,刘娣. 2004
[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核可溶性表达和间接ELISA抗体检测方法的初步建立. 王俊,代军飞,马炳,丁耀忠,欧云文,刘永生,赵乐辉,张永光,张杰. 2018
[6]高致病性PRRSVJL-04/12株核衣壳蛋白的表达与抗原性分析. 王凤雪,刘莹,杨勇,朱洪伟,孙娜,刘杏,程世鹏,温永俊. 2015
[7]猪繁殖与呼吸综合征阻断ELISA抗体检测方法的建立及初步应用. 冯子萱,李宛生,张洪亮,许浒,李超,郭镇洋,彭金美,周国辉,王倩,田志军. 2025
[8]主要组织相容性复合体I类分子抗原肽. 吕小文,吕飞杰,王静. 2005
[9]MHC四聚体技术研究进展. 邓阳,高顺平,吴国华,张强. 2017
[10]RNA病毒的反向遗传学及其在FMDV研究中的应用. 方先珍,刘在新,吴志明,李平花. 2005
[11]猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响. 刘随新,石达,陈建飞,张鑫,时洪艳,刘孝珍,张莎,王璐,冯力. 2013
[12]抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备. 赵世华,戚亭,郭巍,李红梅,王贵宾,刘翠云,仇铮,田志革,王征,卢刚,潘佳亮,相文华. 2012
[13]猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白末端序列在病毒复制过程中的作用分析. 谭菲菲,韦祖樟,孙志,庄金山,袁世山. 2009
[14]猪圆环病毒Ⅱ型修饰Cap蛋白基因的原核表达及纯化. 张锦秀,晁生玉,史利军,候绍华,李刚. 2009
[15]套式病毒目病毒核衣壳蛋白的结构与功能研究进展. 谭菲菲,韦祖樟,袁世山. 2010
[16]猪圆环病毒2型衣壳蛋白(Cap)在293T细胞中的亚细胞定位. 符芳,李曦,李雪松,李海忠,陈欣,王伟,魏萍. 2010
[17]ClassⅠ和ClassⅡ新城疫病毒微型基因组的构建及比较. 于洋,仇旭升,徐丹,詹媛,陈鸿军,于圣青,丁铲. 2010
[18]猪流行性腹泻病毒蛋白对VeroE6核蛋白B23.1的影响. 石达,吕茂杰,陈建飞,时红艳,张志榜,冯力. 2012
[19]稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的CHO细胞系的建立及表达产物的抗原性鉴定. 李翠翠,孙一瑞,王子龙,陈伟业,步志高. 2016
[20]赤羽病病毒核衣壳蛋白基因的表达纯化及活性鉴定. 李少英,冉多良,孟庆文,吴东来. 2005
作者其他论文 更多>>
-
日本脑炎病毒感染上调TRIM26的表达及其功能初步分析
作者：余都;Sharma Mona;黄卉;柳春春;刘珂;李宗杰;邵东华;李蓓蓓;魏建超;马志永;邱亚峰
关键词：日本脑炎病毒;TRIM26;IFN-β;先天免疫
-
猪舍非线性环境因素对猪生产性能影响的研究进展
作者：陈佶;刘伟华;魏建超
关键词：猪;猪舍环境;生产性能;温度;湿度;光照;有害气体
-
非洲猪瘟病毒蛋白的结构和功能研究进展
作者：罗梦;郭子强;李佳乐;帅文娜;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;童光志;韦祖樟;高飞
关键词：非洲猪瘟病毒;结构蛋白;非结构蛋白;免疫逃避
-
全球候鸟感染西尼罗病毒的Meta分析
作者：陶坤盛;何潺;张彤;李宗杰;邵东华;李蓓蓓;魏建超;邱亚峰;马志永;刘珂
关键词：西尼罗病毒;传播;候鸟;Meta分析
-
猪繁殖与呼吸综合征病毒基因重组的研究进展
作者：帅文娜;郭子强;李佳乐;罗梦;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;童光志;高飞
关键词：PRRSV;RNA重组;重组类型
-
表达PPV VP2蛋白的重组PRRSV基因工程活载体疫苗株的构建与免疫原性评价
作者：帅文娜;唐银保;郭子强;李佳乐;罗梦;曾一凡;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;李兆龙;杨倩;童光志;高飞
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪细小病毒;重组病毒;活载体疫苗
-
无针皮内免疫：猪用疫苗未来的发展方向
作者：童光志
关键词：