苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性
文献类型: 中文期刊
作者: 崔婷婷;杜立新;彭琦;张杰;高继国;宋福平
作者机构:
关键词: 苏云金芽胞杆菌;cry基因启动子;转录活性;Cry晶体蛋白;晶体蛋白表达
期刊名称:植物保护
ISSN: 0529-1542
年卷期: 2019 年 1 期
页码: 30-36
摘要: 本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E.分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性.本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件.
分类号: S476
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