数字农科院2.0

猪小肠上皮细胞酵母双杂交cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李慧春;陈鹏飞;李先斌;丁思嘉;王康;张文超;杨德强;李林;徐晶晶;虞凌雪;姜一峰;高飞;于海;童光志;周艳君

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;猪小肠上皮细胞;酵母双杂交cDNA文库

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2019 年 27 卷 2 期

页码： 19-24

收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 猪小肠上皮细胞(intestinal epithelial cell,IECs)是猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)在宿主体内感染的靶细胞,为了研究PEDV在体内与宿主细胞蛋白之间的互作关系以便于揭示其致病机理,本研究以IECs为研究对象,提取了IECs的总RNA,利用SMART技术经过反转录、扩增和纯化获得双链cDNAs后,将其与pGADT7-Rec和carrier DNA共同转化至酵母Y187菌株,进行选择性培养基(SD/-Leu)筛选以及文库容量及质量的鉴定.结果显示,本研究构建的IECs-cDNA文库其库容量为1.3×108 pfu/mL,插入cDNA片段长度为250~2500 bp,文库阳性率达100%.本研究结果表明构建的IECs-cDNA文库具有较好的多态性,为后续研究PEDV与宿主细胞蛋白之间的互作关系提供了有力支持.

分类号： S852.659.6

  • 相关文献

[1]猪小肠上皮细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定. 徐天,石达,陈建飞,谷凤丽,时洪艳,张鑫,冯力. 2014

[2]猪IL-22的原核表达及其活性研究. 应兰,薛美,李麟,符芳,冯力,赵静,刘平黄. 2016

[3]猪肾上皮细胞(PK-15)酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定. 李晓月,王春来,倪宏波. 2019

[4]甘蓝型油菜温敏GMSTE5A幼蕾酵母双杂交cDNA文库的构建及筛选. 李可琪,王莎莎,曾新华,闫晓红,吴刚. 2016

[5]应用酵母双杂交方法筛选与马传染性贫血病毒Rev蛋白相互作用的蛋白. 苏朝,尹鑫,马建,王晓钧. 2015

[6]甘蓝型油菜温敏GMS TE5A幼蕾酵母双杂交cDNA文库的构建及筛选. 李可琪,王莎莎,曾新华,闫晓红,吴刚. 2016

[7]柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库的构建. 徐帅兵,黄兵,赵其平,董辉,朱顺海,崔晓霞,谢雨翔,唐敏,杨志远,韩红玉. 2016

[8]利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究. 郭珊珊,陈伟业,薛美,尹灵丹,罗毅,冯力,刘平黄. 2019

[9]猪流行性腹泻病毒S蛋白受体结合域的分析. 孙东波,陈建飞,时洪艳,申识川,吕茂杰,范秀萍,陈洪岩,冯力. 2009

[10]应用RT-nested PCR检测猪流行性腹泻病毒的研究. 吴凌,李一经,田志军,刘贵元. 2003

[11]猪流行性腹泻病毒S蛋白中和表位区单克隆抗体的制备与鉴定. 孙东波,冯力,时洪艳,陈建飞,崔晓辰,佟有恩. 2007

[12]应用RT-nestedPCR检测猪流行性腹泻病毒的研究. 吴凌,李一经,田志军,刘贵元. 2003

[13]PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定. 孙东波,朗洪武,时洪艳,陈建飞,崔晓辰,王承宝,佟有恩,冯力. 2007

[14]猪流行性腹泻病毒CH/JL毒株S基因的克隆、序列分析及线性抗原表位区的鉴定. 孙东波,冯力,陈建飞,时洪艳,佟有恩,刘胜旺,陈洪岩. 2007

[15]猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响. 刘随新,石达,陈建飞,张鑫,时洪艳,刘孝珍,张莎,王璐,冯力. 2013

[16]猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白全长的原核表达及其反应原性分析. 张志榜,陈建飞,时洪艳,陈小金,冯力. 2011

[17]VeroE6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定. 迟延彬,石达,朱庆贺,陈建飞,时洪艳,张鑫,李长龙,韩斅,刘宁,赵鑫,冯力. 2014

[18]猪流行性腹泻病毒N基因的表达及抗原性分析. 吴玉璐,朱建平,杨莘,王亚欣,徐彦召,虞凌雪,于海,刘光清,童光志,周艳君. 2013

[19]猪流行性腹泻病毒青海株M蛋白基因的克隆与功能位点分析. 兰喜,杨彬,韩庆彦,李宝玉,殷相平,黄连清,柳纪省. 2005

[20]猪流行性腹泻病毒N基因的原核表达与鉴定. 刘华南,曹伟军,杨帆,张艳,杨华,王松豪,郑海学. 2013

作者其他论文 更多>>