文献类型： 中文期刊
作者： 王菊萍;王珍;张铁军;龙瑞才;杨青川;康俊梅
作者机构：
关键词： 蒺藜苜蓿;转录因子;盐胁迫
期刊名称：西北植物学报
ISSN： 1000-4025
年卷期： 2019 年 39 卷 6 期
页码： 963-973
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 科技核心（2020版）
摘要： bHLH(Basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子家族是植物最大的转录因子家族之一,广泛参与植物生长发育和盐胁迫应答机制.该研究利用同源克隆的方法克隆蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的MtbHLH148基因,采用qRT-PCR方法分析MtbHLH148基因在蒺藜苜蓿中的表达特性,构建超表达载体并通过农杆菌侵染法转化拟南芥(A rabidopsis thaliana),对转基因拟南芥的耐盐性相关功能进行分析研究.结果显示:(1)从蒺藜苜蓿中获得MtbHLH148基因,该基因cDNA全长1343 bp,包含开放阅读框为603 bp,编码201个氨基酸,蛋白分子量22.7 kD,等电点为11.76;蛋白结构分析显示,该蛋白无跨膜结构域,无信号肽,为亲水性蛋白;含有精氨酸/赖氨酸残基的保守结构域和典型的bHL H结构域;二级结构以 α-螺旋和无规则卷曲为主.(2)亚细胞定位表明,MtbHLH148蛋白定位在细胞核.(3)进化树分析表明,MtbHLH148与大豆(Glycine max)的亲缘性最近;启动子分析发现,该基因启动子区域含有光响应元件、MYB结合位点以及ABA应答元件ABRE,可能参与非生物胁迫.(4)qRT-PCR分析发现,MtbHLH148基因在蒺藜苜蓿的茎中表达量最高,叶中表达量最低,且MtbHLH148基因受ABA(100μmol/L)诱导并在盐胁迫(200 mmol/L NaCl)处理8 h内表达量上调,而在低温(4℃)处理时表达量明显下调.(5)成功构建超表达载体pCAMBIA3301-MtbHLH148并转化拟南芥获得16个抗性株系,经鉴定有12个过表达株系,其中表达量最高的转基因株系为O E8;对OE8株系耐盐性功能分析发现,转基因拟南芥植株的发芽率明显高于野生型,盐胁迫下转基因拟南芥的根长是野生型的1.5倍,表明其耐盐性得到了增强.研究表明,MtbHLH148基因可能在盐胁迫调节机制中具有一定的调控作用.
分类号： Q785`Q786
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