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Cladosporium tianshanense SL19来源的新型葡萄糖氧化酶的基因克隆及性质研究

文献类型： 中文期刊

作者： 葛建忠;尹亚昕;蒋肖;刘伟娜;姚斌;罗会颖

作者机构：

关键词： 葡萄糖氧化酶;枝孢菌SL19;基因克隆;基因表达;性质研究

期刊名称：中国农业科技导报

ISSN： 1008-0864

年卷期： 2019 年 21 卷 12 期

页码： 49-57

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 葡萄糖氧化酶(GOX)已广泛应用于各种工业生产中.目前,除了曲霉和青霉属来源的GOX外,鲜有新型GOX被报道.经基因克隆和序列同源性分析,Cladosporium tianshanense SL19来源的葡萄糖氧化酶基因CtgoxB是一个新基因,该基因全长1707 bp,无内含子,编码568个氨基酸,N-端第1~16个氨基酸为信号肽,与已报道的GOX序列最高一致性为35%.CtgoxB在毕赤酵母中实现异源表达,但重组蛋白CtGOXB未检测到GOX活性.通过序列和结构分析,同源重组构建的突变体CtGOXB-C1最终恢复了GOX活性.经SDSPAGE鉴定,重组蛋白CtGOXB-C1表观分子量约为120 kDa,大于理论分子量(61.6 kDa).经酶学性质测定,CtGOXB-C1比活为123.8 U/mg,在pH 8.0和30℃条件下具有最高的酶活,且在10℃时依然维持65%的酶活,具有嗜低温特性.CtGOXB-C1在pH 6.0~9.0条件下保温1h后,剩余酶活维持在80%以上,可以在中碱性条件下维持较高酶活,并且对表面活性剂SDS具有较强的抗性.这些性质表明CtGOXB-C1在水产饲料和洗涤剂等行业中具有良好的应用潜力.

分类号： Q78

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