数字农科院2.0

猪丹毒丝菌SpaA蛋白的表达与纯化

文献类型： 中文期刊

作者： 刘博婷;李肇高;严舒焕;李荣君;蔡巩林;林锦铨;彭凌

作者机构：

关键词： 猪丹毒丝菌;表达;spaA基因;纯化

期刊名称：生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2020 年 NULL 卷 1 期

页码： 12-16

收录情况： 科技核心（2020版）

摘要： [目的]在大肠杆菌中表达猪丹毒丝菌spaA基因并纯化重组蛋白.[方法]利用PCR扩增猪丹毒丝菌临床分离株spaA基因,构建重组质粒p GEX-4T-1-spaA,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达融合蛋白GST-SpaA,并优化表达条件.最后采用GST琼脂糖纯化树脂纯化,SDS-PAGE和Western Blotting检测.[结果]成功扩增spaA基因,获得重组表达菌株BL21(DE3)/p GEX-4T-1-spaA;在菌体OD600为0. 9时,加入IPTG至终浓度0. 1 mmol/L,34℃诱导6 h的条件下表达效果最好.经SDS-PAGE检测和纯化后得到大小为97 kDa的GST-SpaA; Western Blotting检测结果表明,GST-SpaA具有良好的免疫原性.[结论]成功在大肠杆菌中表达了SpaA蛋白,经纯化得到具有免疫原性的重组蛋白,为后续研制猪丹毒丝菌SpaA蛋白亚单位疫苗奠定基础.

分类号： S852.61

  • 相关文献

[1]猪丹毒丝菌的分离鉴定及其SpaA基因高变区域的序列分析. 彭凌,杨旭夫. 2016

[2]HCVNS5B蛋白表达、纯化及活性测定. 张秀杰,李莉,欧阳红生. 2008

[3]鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备. 王晓艳,文刚,高玉龙,高宏雷,王笑梅. 2006

[4]福氏志贺菌2aAcrA蛋白的表达、纯化及初步结晶. 魏小娟,张继瑜,王松泰,黄娇娇,李剑勇,周绪正,牛建荣,李金善,李冰. 2009

[5]鸡MHCIα-生物素化序列融合基因的构建、表达及纯化. 刘光亮,童铁钢,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 2006

[6]猪圆环病毒Ⅱ型修饰Cap蛋白基因的原核表达及纯化. 张锦秀,晁生玉,史利军,候绍华,李刚. 2009

[7]单核细胞增多性李氏杆菌野毒株InlB的分子特征及其表达和纯化研究. 孟庆玲,乔军,才学鹏,景志忠,贾桂珍. 2007

[8]Asia1型口蹄疫病毒VP1基因的克隆、原核表达及纯化. 独军政,常惠芸,丛国正,林彤,邵军军,魏小娟,刘在新,谢庆阁. 2005

[9]牛传染性鼻气管炎病毒gB基因的截短表达与间接ELISA诊断方法的建立. 李兆利,薛飞,朱远茂,王延辉. 2006

[10]猪MHC-Ⅰ α生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化. 肖一红,刘光亮,王群,童铁钢,白宇,孟庆文,吴东来. 2008

[11]驽巴贝虫病间接ELISA检测方法的建立. 龚真莉,刘光远,谢俊仁,柴慧萍,张丽艳,李知新,田占成,王路,刘建刚. 2010

[12]小反刍兽疫病毒P蛋白的表达、纯化及抗体的制备及初步应用. 翟军军,窦永喜,张海瑞,毛立,蒙学莲,王秋霞,骆学农,才学鹏. 2010

[13]区分动物疫苗免疫与病毒感染的口蹄疫非结构蛋白3AB鉴别诊断试剂盒的研制. 陈波,尤永进,潘洁,朱彩珠,饶钟,陈倍娟,吴永明,顾晓峰,游丕荣,徐泉兴,卢永干. 2007

[14]赤羽病病毒核衣壳蛋白基因的表达纯化及活性鉴定. 李少英,冉多良,孟庆文,吴东来. 2005

[15]猪β_2肾上腺素受体的表达、纯化及鉴定. 王健,刘媛,王静. 2016

[16]单核细胞增生李斯特菌sRNA伴侣分子hfq的基因克隆、表达及纯化. 彭叶龙,乔军,孟庆玲,谢堃,陈诚,刘田莉,马玉,才学鹏,陈创夫. 2014

[17]马β_2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的高效表达与纯化. 童铁钢,刘光亮,徐树兰,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 2005

[18]猪MHC-Ⅰa生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化. 肖一红,刘光亮,王群,童铁钢,白宇,孟庆文,吴东来. 2007

[19]猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化. 胡涛,才学鹏. 2006

[20]茨城病毒VP7蛋白基因的克隆表达及间接ELISA方法的建立. 张文龙,刘光亮,王君伟,吴东来. 2007

作者其他论文 更多>>