非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
作者: 杜楠楠;高飞;姜一峰;郑浩;童武;李国新;张宽;张玉娇;黄剑;童光志
作者机构:
关键词: 非洲猪瘟病毒;p17蛋白;D117L基因;实时荧光定量PCR
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2020 年 NULL 卷 4 期
页码: 423-429
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 为建立检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的快速诊断方法,本研究根据ASFV SY18株p17蛋白的编码基因D117L的保守序列设计并合成引物和探针,建立了基于ASFV p17蛋白的编码基因D117L的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性.结果显示,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的C_t值与标准品在1*10~9~1*10~1copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-3.192,检测下限为10 copies/μL,且与其他能引起相似症状的猪源病毒无交叉反应.重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.920 7%,重复性好.此方法可用于ASF的早期诊断和ASFV快速检测.
分类号: S852.651
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