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褪黑素对水貂GV期卵母细胞冷冻保存效率的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 曹俊国;李文;韩玉萍;杨镒峰;魏海军;许保增

作者机构:

关键词: 褪黑素;水貂;卵母细胞;玻璃化冷冻

期刊名称:中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2020 年 NULL 卷 4 期

页码: 816-822

收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)

摘要: 旨在探究水貂生发泡期(GV期)卵丘-卵母细胞复合体(COCs)玻璃化冷冻、解冻及培养过程中添加褪黑素(melatonin,MT)对水貂卵母细胞解冻后存活率、体外培养COCs恢复减数分裂比例(GVBD率)、体外培养卵母细胞活性线粒体的分布以及体外培养COCs颗粒细胞糖酵解相关基因表达(卵母细胞与颗粒细胞缝隙连接好坏的标志分子)的影响.试验分为3组:无冷冻处理的对照组(C组)、冷冻组(V组)和添加MT(10-9 mol/L)的冷冻处理组(MT组).结果显示:MT组卵母细胞在解冻后3 h的存活率(91%±4.8%,n=91)与V组的存活率(90%±2.7%,n=75)差异不显著(P>0.05),但两组存活率显著低于C组(100%,n=80)(P<0.05);C组(81%±1.9%,n=64)和MT组卵母细胞的GVBD率(70%±2.7%,n=80)显著高于V组(55%±4.1%,n=80)(P<0.05),但C组与MT组相比差异不显著(P>0.05);免疫荧光结果显示,MT组的卵母细胞线粒体正常分布率(34%±3.8%,n=75)与V组(30%±2.3%,n=60)相比差异不显著(P>0.05),但MT和V组的卵母细胞线粒体正常分布率显著低于C组(79%±3.4%,n=90)(P<0.05);qRT-PCR结果显示,MT组颗粒细胞糖酵解基因Ldh1、Pkm2及Pfkp的表达量显著高于V组(P<0.05),但前两者糖酵解基因的表达量显著低于C组(P<0.05).结果表明,添加MT可以提高冻融后水貂卵母细胞的GVBD率,降低冷冻对卵母细胞和颗粒细胞连接的冷冻损失,但要建立一个高效的水貂GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存体系仍需进一步研究.

分类号: S865.22

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