流产布鲁氏菌omp25基因的克隆与原核表达
文献类型: 中文期刊
作者: 杨春华;邱昌庆;曹小安
作者机构:
关键词: 流产布鲁氏菌;omp25基因;克隆;原核表达
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2007 年 37 卷 06 期
页码: 465-468
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 用设计的1对特异性引物对流产布鲁氏菌2型CVCC70502株总DNA进行外膜蛋白基因omp25的PCR扩增,得到了1条完整的基因,大小为642 bp;测序分析证明,它与国外报道的流产布鲁氏菌omp25基因的核苷酸序列完全一致。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导。结果证实,该基因可以在大肠杆菌中表达,表达产物为分子质量约50 ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Western-blotting试验证明,表达蛋白OMP25可被流产布鲁氏菌阳性血清所识别。
分类号: S852.61
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