文献类型： 中文期刊
作者： 焦文娟;李飞强;张敏菁;史肖肖;朱木菲;毛存贵;祝增荣
作者机构：
关键词： 鞘脂质;鞘氨醇激酶;灰飞虱;RNA干扰;荧光定量PCR
期刊名称：中国农业科学
ISSN： 0578-1752
年卷期： 2016 年 49 卷 22 期
页码： 4387-4397
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】明确灰飞虱(Laodelphax striatellus Fallén)鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SK)的分子特征,研究SK在携带水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)与健康灰飞虱两个种群的时空表达及其对杀虫剂胁迫的响应。【方法】利用PCR技术克隆灰飞虱SK(LsSK)基因序列;使用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析LsSK在带毒种群与健康种群灰飞虱1—5龄若虫及成虫期的表达差异,并检测该基因在雌雄虫头、唾液腺、中肠、马氏管、卵巢和精巢等组织中相对表达量;采用手动微量点滴仪将3种杀虫剂(吡虫啉、噻嗪酮和溴氰菊酯)点滴于灰飞虱4龄若虫中胸背板,确定3种杀虫剂的半致死浓度(LC_50);根据半致死浓度的3种杀虫剂处理试虫后检测LsSK的表达动态;采用注射双链RNA(dsRNA)的方法沉默带毒种群和健康种群4龄若虫体内LsSK后,用半致死浓度的3种杀虫剂处理试虫并分析死亡率。【结果】克隆得到一段长度为1 282 bp的LsSK基因片段(Gen Bank登录号:KT989975)。氨基酸系统进化树显示LsSK与其他半翅目昆虫SK聚在同一支。LsSK氨基酸序列包含SK酶的4个保守区域C1—C4,其中SK激酶的活性位点——DAG活性区域位于C1—C3区域。q RT-PCR结果显示LsSK在带毒种群4龄若虫中表达量最高,3龄次之;健康种群5龄若虫表达量最高,1、4龄次之。且LsSK在带毒种群3、4龄表达量显著高于健康种群同时期若虫(P<0.05);带毒成虫LsSK表达量显著高于健康成虫(P<0.05)。LsSK在带毒雄成虫各个组织中的表达量均显著高于同种群雌成虫和健康雌雄成虫的各相应组织,且在唾液腺和马氏管的表达量最高,头部次之。用半致死浓度的3种杀虫剂(吡虫啉LC_50为6.5 ng·μL~(-1),噻嗪酮为500 ng·μL~(-1),溴氰菊酯为37.5 ng·μL~(-1))处理带毒和健康种群的4龄若虫后,试虫LsSK含量变化与响应速度均不同。噻嗪酮处理后LsSK水平升高且响应最为迅速,溴氰菊酯处理后LsSK表达水平无变化(P>0.05)。用3种杀虫剂处理带毒和健康试虫,其死亡率分析结果表明,两种群注射dsSK组3种杀虫剂处理后死亡率均显著高于两种群注射dsGFP组和不注射组。【结论】克隆了LsSK基因片段且其在带毒灰飞虱4龄若虫中表达量最高。沉默LsSK后,带毒和健康种群灰飞虱在杀虫剂处理后的死亡率均显著上升,表明SK基因有利于灰飞虱抵抗杀虫剂胁迫。
分类号： S433
- 相关文献
[1]灰飞虱体内水稻条纹病毒基因的RNA干扰效应. 林克剑,贺康,王桂荣,李飞. 2013
[2]水稻黑条矮缩病抗性遗传研究进展. 刘晴,徐建龙. 2022
[3]灰飞虱胁迫下水稻防卫相关基因的表达. 李万昌,余娇娇,段灿星,朱振东,王晓鸣. 2012
[4]荧光定量PCR检测灰飞虱胁迫下水稻相关防卫基因的表达量变化. 余娇娇,段灿星,李万昌,朱振东,李洪杰,王晓鸣. 2011
[5]麦长管蚜唾液蛋白C002的基因克隆与RNA干扰研究. 范佳,孙永伟,王根平,陈红梅,闫婷,杜文明,夏兰琴. 2014
[6]麦长管蚜OBP7基因的RNA干扰. 尹姣,曹雅忠,樊东,李克斌. 2015
[7]二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析. 郑作林,周瀛,杨琼,巩中军,程家安,祝增荣. 2013
[8]水稻条纹叶枯病毒对灰飞虱生物学特性及若干生理生化特性的影响. 贺康,郭金梦,李飞,林克剑,王桂荣. 2018
[9]滞育对灰飞虱生理生化特性的影响. 宋菁菁,朱文超,林克剑,王桂荣. 2017
[10]水稻播种和移栽期对本地越冬主要病虫害发生的影响. 朱金良,祝增荣,冯金祥,蔡雪涛,钟雪明,程家安. 2011
[11]人工饲养不同世代灰飞虱群体传播水稻黑条矮缩病毒的比较. 张爱红,闫冲,孟凡思,霍良占,邸垫平,苗洪芹,王锡锋. 2016
[12]云南地方水稻品种对灰飞虱的抗性筛选. 林克剑,李正跃,桂富荣,蒋兴川,李凡. 2013
[13]沿黄稻区水稻品种对水稻条纹叶枯病抗性评价. 任应党,李莉,王锡锋,刘红彦,鲁传涛,周广和. 2009
[14]转cry1C和cry2A不同抗虫基因水稻品种强非靶标害虫灰飞虱生物学特性的影响. 林克剑,李飞,侯茂林. 2011
[15]8个水稻品种的条纹叶枯病抗性特征. 孙黛珍,江玲,张迎信,程遐年,王春明,翟虎渠,万建民. 2006
[16]基于rDNAITS1和ITS2序列的褐飞虱、白背飞虱和灰飞虱的分子鉴定. 林克剑,韩兰芝,侯茂林. 2009
[17]灰飞虱共生菌groEL基因的克隆、生物信息学分析及其植物双元表达载体构建. 曹卿,杨杰,王军,范方军,仲维功,张玉琼,张云华. 2010
[18]不同水稻品种对灰飞虱抗性机理的初步研究. 彭高松,王晓鸣,朱振东,段灿星. 2010
[19]稻田灰飞虱种群数量动态和空间结构初步分析. 林克剑,任应党,侯茂林,鲁传涛,刘红彦,黄兴奇. 2011
[20]水稻种质资源抗灰飞虱评价及抗性机制分析. 张世贤,陈青,程治军,翟虎渠,万建民. 2007
作者其他论文 更多>>
-
警惕茄科作物重大害虫马铃薯木虱入侵风险及危害
作者：何小丽;EMILIANO Veronesi;WRATTEN Stephen;祝增荣;高玉林;周文武
关键词：马铃薯;马铃薯木虱;入侵害虫;化学防治;生物防治
-
冬水田典型生境类型节肢动物群落多样性及生物量特征
作者：白耀宇;庞帅;殷禄燕;宋艾妮;祝增荣
关键词：冬水田;节肢动物群落;生物量;级联效应;采后季节
-
水分胁迫下水稻对褐飞虱转录组的影响
作者：谭椰;徐文彦;周文武;鹿东东;商晗武;祝增荣
关键词：褐飞虱;转录组测序;水分胁迫;基因表达;实时荧光定量PCR
-
高通量测序及其在食物网解析中的应用进展
作者：王雪芹;王光华;乔飞;高其康;Kong Luen HEONG;祝增荣;程家安
关键词：第二代测序;捕食/植食性动物;营养关系;食物转换;宏条形码技术
-
白背飞虱气味结合蛋白SfOBP11与寄主选择行为的相关性研究
作者：蒋艳冬;梁庆梅;白月亮;周文武;刘苏;王光华;祝增荣
关键词：白背飞虱;气味结合蛋白;寄主选择;RNA干扰
-
白背飞虱细胞色素P450还原酶基因的分子特征与表达模式分析
作者：余航;刘苏;朱晴子;周文武;梁庆梅;史肖肖;祝梓杰;祝增荣
关键词：细胞色素P450还原酶;白背飞虱;杀虫剂;表达模式
-
福寿螺对水稻的为害及其产量损失研究
作者：叶建人;林贤文;祝增荣
关键词：福寿螺;水稻;产量损失;入侵时间