猪圆环病毒2型分子标记毒株的构建及生物学特性研究
文献类型: 中文期刊
作者: 刘长明;危艳武;张超范;陆月华;孔宪刚
作者机构:
关键词: 猪圆环病毒2型;遗传标记病毒;生物学特性
期刊名称:中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集
ISSN:
年卷期: 2006 年
页码: 4
收录情况: CSCD
摘要: 以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆.通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入Sall制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株.采用免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫电镜、核酸序列分析表明,在病毒感染细胞中检出病毒特异抗原,其抗原性、病毒形态学及基因序列与亲本毒株一致.鉴于新病毒基因组内插入一个SalI酶切位点,可用限制性片断长度多态性分析法可与野生型病毒相鉴别.新毒株经细胞连续传80代,体外培养增殖性能稳定,毒价可达107.0TCID50/ml.取第60代病毒培养物经肌肉...
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