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猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李西玉;许信刚;周继章;邱昌庆;曹小安;宫晓炜;王光华

作者机构：

关键词： 猪;流产嗜性衣原体;MOMP蛋白;原核表达

期刊名称：西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2010 年 07 期

页码： 33-38+43

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆猪流产嗜性衣原体青海株主要外膜蛋白(Major outer membrane protein,MOMP)基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的猪流产嗜性衣原体MOMP基因的核苷酸序列,设计并合成4条特异性引物,用套式PCR方法扩增猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,将其克隆入pMD18-T载体中,进行测序及序列分析。然后将MOMP基因亚克隆入原核表达载体pGEX4T-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot检测。【结果】扩增到猪流产嗜性衣原体青海株1170bp的MOMP全长基因。序列分析结果表明,该基因与已发表的猪流产嗜性衣原体B11001株和CP/12株核苷酸同源性均为99.7%。SDS-PAGE电泳可检测到分子质量约为66ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在。Western-blot分析表明,重组蛋白可被猪流产嗜性衣原体抗体识别。【结论】成功克隆了猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,并进行了原核表达,表达的蛋白具有抗原活性。

分类号： S852.67

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