小反刍兽疫病毒融合蛋白基因的克隆、序列分析及表达
文献类型: 中文期刊
作者: 倪伟;才学鹏;乔军;孟庆玲;陈创夫;任艳
作者机构:
关键词: 小反刍兽疫病毒;融合蛋白基因;克隆;原核表达
期刊名称:石河子大学学报(自然科学版)
ISSN: 1007-7383
年卷期: 2011 年 29 卷 01 期
页码: 35-39
摘要: 根据GenBank报道的小反刍兽疫病毒(PPRV)融合蛋白(F)基因序列,用特异性引物对PPRV疫苗株F蛋白基因进行了RT-PCR扩增,并将其克隆到pGEM-T载体中进行测序。结果表明:F基因ORF全长1641 bp,编码546个氨基酸;推导的氨基酸序列中第1~18位氨基酸构成信号肽序列,第488~510氨基酸为跨膜区。构建原核表达载体pETF1和pETF2,转化E.coliBL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western-blotting的分析结果表明,F1和F2基因在大肠杆菌中均获得了表达,且均具有良好的反应原性。用Ni-NTA试剂盒纯化F1和F2重组蛋白,为研发检测PPRV特异性抗体的诊断试剂奠定了基础。
分类号: S852.65
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