弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达
文献类型: 中文期刊
作者: 张燕丽;曹丽艳;芦赟;苟惠天;王艳华;付宝权;李文卉;张德林
作者机构:
关键词: 刚地弓形虫;微线体蛋白3;基因克隆;真核表达
期刊名称:中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集
ISSN:
年卷期: 2009 年
页码: 2
收录情况: CSCD
摘要: 采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增MIC3基因,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。将重组质粒转染BHK-21细胞。间接免疫荧光染色证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液及上清样品中有一条约39.2ku的条带,可被山羊抗弓形虫高免血清所识别,大小与预测值相符。表明真核表达质粒pcDNA3-MIC3中的MIC3基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。
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