显微注射构建烟粉虱的RNAi技术体系
文献类型: 中文期刊
作者: 李如美;王少丽;张友军
作者机构:
关键词: RNA干扰;显微注射;烟粉虱;dsRNA;实时荧光定量PCR
期刊名称:应用昆虫学报
ISSN: 2095-1353
年卷期: 2015 年 52 卷 02 期
页码: 504-509
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: RNAi已经成为揭示基因功能的一个常用的有力工具。在昆虫RNAi技术体系中,通过显微注射方法向昆虫体内注入dsRNA,实现系统性干扰,是最为广泛采用的方法。但对于体型较小的昆虫,注射法操作存在较大的难度,特别是非常微小的昆虫烟粉虱Bemisia tabaci。为了进行烟粉虱大规模基因功能验证,需要开发一套成熟的RNAi技术体系。本研究以烟粉虱的CYP6CM1基因为目标基因,通过显微注射法注射不同浓度的dsRNA到烟粉虱4龄若虫,荧光定量PCR检测其沉默效果。结果表明:在对单头烟粉虱注射50 n L时,注射不同浓度的dsRNA,对CYP6CM1基因的沉默效果不同,最大沉默效率可达到80%以上。因此,本实验成功构建了烟粉虱的RNAi技术体系,也可用于其它粉虱类害虫的RNAi技术。
分类号: S433
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