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4种猪绦虫蚴的多重PCR鉴别

文献类型： 中文期刊

作者： 陈国梁;郭爱民;张少华;梁盼红;李艳萍;王立群;刘婷丽;白雪;骆学农

作者机构：

关键词： 猪;4种绦虫蚴;多重PCR;鉴别诊断

期刊名称：中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2021 年 37.0 卷 6.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 科技核心（2020版）

摘要： 目的建立一种多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction, mPCR)方法,用于快速鉴别猪囊尾蚴等4种猪的绦虫蚴。方法比较猪带绦虫(Taenia solium)、亚洲带绦虫(Taenia asiatica)、细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)和泡状带绦虫(Taenia hydatigena)的线粒体基因组,选取tRNA-Val、tRNA-Ala、tRNA-Asp和nad1基因作为分子检测靶标,设计4条种特异性上游引物(TaF、EgF、ThF、和TsF)和1条下游通用引物(TR),通过优化反应条件和体系,建立了在一个PCR体系中即可完成对4种猪绦虫蚴的快速鉴别的mPCR方法。结果 4种猪绦虫蚴的特异性PCR引物等比例混合后,在退火温度为50℃的条件下,该mPCR方法可同时扩增出C.cellulosae、T.asiatica、E.granulosus和C.tenuicollis的特异性基因片段,其大小分别为478 bp、710 bp、619 bp和542 bp。PCR产物测序后经BLAST比对,与同种虫体的基因序列相似性在99%以上。结论本研究建立的mPCR方法具有很高的种间特异性,并且可通过扩增片段的大小对4种猪绦虫蚴进行快速、准确的鉴别。

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