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宿主蛋白核仁素与病毒基因组结合促进牛肠道病毒的复制

文献类型： 中文期刊

作者： 魏丹丹;孙超;常继涛;于力

作者机构：

关键词： 牛肠道病毒;核仁素;内部核糖体进入位点;病毒复制

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了探究宿主蛋白核仁素（NCL）对牛肠道病毒（BEV）复制的影响及其作用机制，本研究在过表达或敲低NCL的乳仓鼠肾细胞（BHK-21）中感染BEV，用qPCR、Western blot及TCID50分别检测病毒基因组RNA 、BEV结构蛋白VP1及病毒滴度的变化，结果表明，过表达NCL明显促进BEV在BHK-21细胞中的复制，而敲低NCL明显抑制BEV的复制。进而用NCL特异性抗体对感染BEV的BHK-21细胞进行RNA免疫共沉淀试验检测蛋白与病毒基因组是否结合，结果表明，NCL可以与BEV基因组RNA结合。而且，通过激光共聚焦试验观察接种BEV的BHK-21细胞中NCL蛋白的亚细胞定位和分布，结果表明，BEV感染细胞后使NCL由核仁迁移至细胞质，与病毒基因组在细胞质中共定位。另外，通过双荧光素酶报告基因试验分别在NCL过表达或敲低的BHK-21细胞检测BEV的内部核糖体进入位点（IRES）介导的病毒蛋白翻译起始活性，结果表明，过表达NCL显著提高BEV IRES的翻译起始活性，而敲低NCL显著抑制BEV IRES的翻译起始活性。本研究首次证实NCL与BEV基因组间存在相互作用，该互作可促进BEV IRES介导的病毒蛋白翻译以及BEV复制的功能，该结果为BEV复制的分子调控机制提供了新的见解。

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