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用于传染性支气管炎病毒核酸检测的N蛋白基因装甲RNA质控品的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 熊曜宇;刘丹;高建帅;李慧彤;张博源;丁家波;蒋卉;范学政;沈青春

作者机构：

关键词： 禽传染性支气管炎;N蛋白;质控样品;核酸检测;装甲RNA

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 旨在研制可应用于传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus， IBV）核酸检测的质控品。本研究选取IBV较为保守的N蛋白基因作为目标靶序列，将其与MS2噬菌体衣壳蛋白基因、包装位点序列等克隆到载体pET-28a(+)中，经诱导表达和纯化，获得内部包含有IBV的N蛋白基因序列RNA的类病毒颗粒，用电镜观察其物理特征，数字PCR对拷贝数进行精确定量，使用现行国家标准GB/T23197—2022中的实时荧光定量RT-PCR方法对纯化后的装甲RNA进行了检测验证，RNase酶抵御能力以及保存稳定性进行了检验。综上，本研究成功构建、表达组装出了包含IBV N基因的装甲RNA，耐RNase酶的降解，可在37℃下可稳定保存15 d以上。制备的装甲RNA具备成为IBV阳性质控品的潜力，可实现对该RNA病毒检测全过程的质控。

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