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布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白的原核表达及对鼠源树突状细胞的作用

文献类型： 中文期刊

作者： 张广林;徐龙;高云艳;李玲霞;尚佑军;张勇;曹小安;赵兴绪

作者机构：

关键词： 布鲁氏菌; 树突状细胞; 免疫细胞活化

期刊名称：浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了研究和探讨布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白对鼠源树突状细胞（BM-DCs）分化和成熟的影响,用布鲁氏菌S2疫苗株为模板扩增L7/L12基因,构建重组质粒pET30a-L7/L12,用大肠埃希菌原核表达系统进行诱导表达,并用Ni柱对表达的蛋白进行纯化。用IL-4和GM-CSF诱导培养鼠源DCs,用LPS和L7/L12蛋白刺激DCs后检测其表面共刺激分子和炎症因子的变化。结果表明,重组蛋白在1 mmol·L-1的IPTG、16℃过夜的条件下以可溶性形式高效表达,其大小为18 ku,纯度达到93%以上并有一定的反应原性。流式细胞仪检测被刺激的BM-DCs细胞表面CD40、CD80等抗原分子的表达显著（P <0.05）高于空白对照组。QPCR结果显示炎性细胞因子TNF、IL-1β、IL-12极显著（P <0.01）高于空白对照组。重组L7/L12蛋白具有刺激DCS细胞分化、成熟和促进炎症因子释放的功能。

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