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效应蛋白Rhs对鼠伤寒沙门菌生物学特性影响的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 董震;王志林;陈启伟;吴锦艳;尚佑军;刘永生;杨世华;兰喜

作者机构：

关键词： 鼠伤寒沙门菌;效应蛋白Rhs;生物学特性

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2022 年 2 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为探究鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)Ⅵ型分泌系统(T6SS)分泌的效应蛋白Rhs对该菌生物学特性的影响,本研究利用Red同源重组技术构建了鼠伤寒沙门菌rhs1和rhs2基因缺失株CVCC541△rhs1和CVCC541△rhs2,同时构建了基因回补菌株C-△rhs1和C-△rhs2,并经PCR和测序鉴定正确后,测定了鼠伤寒沙门菌亲本株和缺失株的遗传稳定性、生长曲线,结果显示,缺失株经过多次传代后仍然具有稳定的遗传性;Rhs效应因子缺失对细菌的生长未造成明显影响.进一步利用各菌株感染Hela细胞,对菌株黏附力和侵袭力进行测定,结果显示,与亲本株相比,缺失株CVCC541△rhs1和CVCC541△rhs2对Hela细胞的黏附力无明显影响,但侵袭力分别提高了4.9倍和3.4倍.利用各菌株感染RAW264.7巨噬细胞,检测各株菌在RAW264.7细胞内的存活力,结果显示缺失株CVCC541△rhs1和CVCC541△rhs2在RAW264.7细胞内存活力分别提高了 7.8倍和5.9倍.将各菌经株腹腔注射感染小鼠,检测其对小鼠的半数致死量(LD50),结果显示,亲本株的LD50为2.53×106 cfu/mL,缺失株CVCC541△rhs1、CVCC541△rhs2的LD50分别为1.31×107 cfu/mL和5.40×106 cfu/mL,LD50分别下降了 5.2倍和2.1倍.本研究首次证实效应蛋白Rhs会影响鼠伤寒沙门菌的侵袭力和细胞内的生存能力,同时也会降低细菌的毒力,在鼠伤寒沙门菌感染过程中发挥了作用,该结果为阐释鼠伤寒沙门菌的致病机制提供了参考.

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