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猪丁型冠状病毒S1-CTD相互作用宿主蛋白的筛选和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 汤荣锋;范前进;郭龙军;张鑫;石达;时洪艳;陈建飞;冯力

作者机构：

关键词： 猪丁型冠状病毒;S1-CTD蛋白;相互作用;KIFBP

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 猪丁型冠状病毒纤突蛋白S1亚基C端结合域（S1-CTD）是诱导中和抗体产生的主要区域，为研究与其相互作用的宿主蛋白，采用HEK-293T真核表达系统表达并纯化了S1-CTD，提取了猪回肠上皮细胞膜蛋白，通过免疫共沉淀筛选了可能与S1-CTD相互作用的蛋白并进行质谱分析，发现32个疑似相互作用的宿主蛋白。构建其中可能与S1-CTD互作的蛋白KIF1 binding protein（KIFBP）的真核表达质粒，通过免疫共沉淀和激光共聚焦验证上述宿主蛋白与S1-CTD是否存在相互作用，结果表明KIFBP和S1-CTD之间存在相互作用，共同转染时在细胞质共定位。进一步研究表明，过表达KIFBP能够有效降低病毒RNA水平和病毒滴度，其中mRNA水平降低了约70%，病毒滴度降低了101.6TCID50。综上，本研究筛选并鉴定出了一种与PDCoV S1-CTD相互作用的宿主蛋白KIFBP，为了解PDCoV的致病机制提供了理论基础。

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