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超薄切片技术的优化及其在兽医研究中的应用

文献类型： 中文期刊

作者： 史永红;陈秋生

作者机构：

关键词： 超薄切片;透射电镜;皮肤;DTMUV;微孢子虫;PRV

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; 科技核心（2021版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 超薄切片技术作为兽医领域研究的重要手段得到了广泛的应用，然而超薄切片技术的通用制备程序对不同样品的并非都能获得较高质量的结果。本研究基于传统的电镜技术，首先通过对羊皮肤超薄切片技术的优化，然后用优化的方法在DTMUV感染鸭脑组织及BHK-21细胞、微孢子虫感染的三疣梭子蟹肌肉组织以及PRV感染的vero细胞3种样品中进行应用验证。优化主要通过在常规固定液中加入4%的多聚甲醛改良固定液、全程使用丙酮为脱水剂、增加30%脱水步骤、100%脱水采取时间梯度（10、15、20、30 min）脱水、延长浸透为常规双倍并且增加一部纯包埋剂等方法的优化，证实优化后的步骤能够稳定获得平整厚度均一的切片；使用20%乙醇配置的醋酸双氧铀溶液及延长染色时间至20 min，证实能够使得切片干净平整无污染且染色反差好；使用75目的大孔径载网捞片，结果大大增加了切片的可观察区域。通过这些优化可以获得大视野的高质量的超薄切片，并且在DTMUV感染鸭脑组织及BHK-21细胞、微孢子虫感染的三疣梭子蟹肌肉组织以及PRV感染的vero细胞中得到了验证，表明优化的超薄切片技术能够满足兽医超微形态学研究的应用。

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