紫云英(Astragalus sinicus)LHY基因克隆及鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 张贤;庄俐;曹卫东;曹凯;徐静;斯林林;王建红
作者机构:
关键词: 紫云英;LHY;成花;生物信息学分析;表达分析
期刊名称:农业生物技术学报
ISSN: 1674-7968
年卷期: 2023 年 31 卷 11 期
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 紫云英(Astragalus sinicus)是我国南方稻区主要绿肥作物之一,对土壤资源可持续利用具有重要意义,花期调控是紫云英育种中的重要目标。生物钟基因响应昼夜节律变化,通过影响光周期途径中成花基因的表达参与植物开花调控,LHY (late elongated hypocoty l)基因是关键生物钟基因之一。为探究紫云英中LHY基因的功能,本研究利用Illumina Hiseq方法和RACE(rapid-amplification of cDNA ends)克隆技术分离了紫云英LHY基因全长序列;利用生物信息学分析软件进行LHY基因的生物信息学分析;q RTPCR分析LHY基因在不同组织中的表达模式,揭示基因表达与紫云英成花的关系;并通过拟南芥(Arabidopsis thaliana)遗传转化,进一步鉴定紫云英LHY基因的功能,明确其对成花的影响。结果表明,本文首次克隆了紫云英LHY基因(GenBank No. OP455117),cDNA全长为2 865 bp,含开放阅读框长度为2259 bp,编码752个氨基酸,LHY基因的同源蛋白在不同植物间具有较高的相似性,尤其与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)、野生大豆(Glycine soja)等豆科植物相似性达75%以上。qRT-PCR分析结果显示,在紫云英叶片、花和花芽中LHY基因的表达量最高。超表达紫云英LHY基因的转基因拟南芥株系,表现出了显著的晚花性状,抽薹天数平均比野生型晚18.36 d,开花天数平均比野生型晚20.72 d,表明紫云英LHY基因可能具有晚花功能,抑制植物开花。本研究为解析紫云英开花调控机理提供了科学依据。
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