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猪细小病毒VP2基因在家蚕中的高效表达及免疫原性评估

文献类型： 中文期刊

作者： 占鹏飞;窦金萍;易咏竹;刘兴健;李轶女;冯世民;张志芳;张金卫

作者机构：

关键词： 猪细小病毒（PPV）;病毒空衣壳颗粒（VLP）;杆状病毒表达系统;免疫效力;家蚕

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2023 年 31 卷 06 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 猪细小病毒（Porcine parvovirus, PPV）可引起猪（Sus scrofa domesticus）繁殖障碍，疫苗是预防猪细小病毒病、提高母猪抗病力和繁殖率的有效方法。为高效表达猪细小病毒结构蛋白VP2基因及制备猪细小病毒基因工程亚单位疫苗，根据家蚕密码子频率将PPV-VP2的基因序列进行优化合成，并将此目的基因片段连接到转移载体，通过共转染将目的基因重组到orf1629基因缺损的亲本病毒BmBacmid上，获得重组杆状病毒（Recombinant baculovirus） rBmNPV（PPV-VP2）。将重组杆状病毒rBmNPV（PPV-VP2）感染家蚕（Bombyx mori）蚕蛹，并用表达的抗原制作疫苗，采用豚鼠（Cavia porcellus）进行疫苗效力试验。经Western blot和质谱分析、电镜观察表达产物。结果表明，在蚕蛹中成功表达出可自组装成病毒空衣壳颗粒的目的蛋白；表达蛋白产物经血凝反应测定，每克蚕蛹表达的抗原效价相当于200剂以上商用疫苗；用表达产物制备成3种抗原剂量的疫苗免疫豚鼠，均产生抗体反应，其抗体能在体外中和PPV病毒。即使每克蚕蛹制备200头份疫苗免疫豚鼠，其血凝抑制效价（hemagglutination inhibition, HI）也达到了1∶128，中和抗体效价达到1∶83，不低于市售商品苗免疫产生的效价。本研究为猪细小病毒亚单位空衣壳疫苗提供了低成本生产方法。

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