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犬细小病毒颗粒疫苗的研制与免疫效果评价

文献类型: 中文期刊

作者: 李昀真;代昕宇;李双双;许丽文;张成琪;胡博;白雪

作者机构:

关键词: 犬细小病毒;新型疫苗;病毒样颗粒;杆状病毒

期刊名称:中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2023 年

页码:

收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)

摘要: 犬细小病毒性肠炎是由犬细小病毒(CPV)引起的一种高度传染性疾病,目前最为有效的防控方法为疫苗接种。本研究将CPV VP2基因克隆于pQB3载体中,将鉴定正确的pQB3-VP2重组质粒与qBac-ⅢG杆粒共转染至sf9昆虫细胞中,拯救获得表达CPV VP2蛋白和绿色荧光蛋白的重组杆状病毒rBac-VP2。rBac-VP2感染sf9细胞可出现明显的细胞病变,在荧光显微镜下可见明显的绿色荧光,间接免疫荧光鉴定显示rBac-VP2感染的sf9细胞可见明显的红色荧光。对细胞表达的VP2蛋白进行Western-blot鉴定,结果显示在约65 ku处可见明显的目标蛋白条带,电镜下可见与天然细小病毒形态大小相似的粒子,表明rBac-VP2感染昆虫细胞后可组装形成病毒样颗粒(VLPs),收获的VLPs血凝效价可达1∶210。将CPV VLPs免疫小鼠后诱导机体产生的血凝抑制抗体,效价达1∶27,与宠必威?幼犬保商业化疫苗产生的免疫效果相当。本研究为犬细小病毒新型基因工程疫苗的研制奠定了基础。

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