弓形虫SRS20A基因缺失株的构建及生物学功能研究
文献类型: 中文期刊
作者: 高栋;王生辉;曹杰;周勇志;王亚楠;周金林;张厚双
作者机构:
关键词: 弓形虫;SRS20A;CRISPR/Cas9;基因缺失
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2026 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,感染了全世界约三分之一的人口。弓形虫SRSs蛋白属于表面抗原1相关序列(SAG1-related sequence)蛋白家族成员,这些蛋白在弓形虫侵染宿主的各个阶段中发挥着重要作用。为探究弓形虫SRSs蛋白家族新成员SRS20A的功能,本试验以弓形虫Ⅱ型PLK虫株为亲本,运用CRISPR/Cas9技术构建了SRS20A基因缺失虫株SRS20A-KO,并对其生物学特性进行了研究。与PLK虫株相比,SRS20A-KO株在人包皮成纤维(HFF)细胞上形成的噬斑显著变小,入侵能力显著减弱,而复制能力无显著差异。利用RT-qPCR检测SRS20A-KO基因缺失株感染BV2细胞的IFN-γ和IL-12转录水平发现,SRS20A-KO株转录水平显著低于PLK虫株。小鼠毒力试验结果显示,低剂量SRS20A-KO株不会引起ICR小鼠的死亡,表明缺失虫株毒力减弱。本试验成功构建了弓形虫SRS20A-KO株,发现SRS20A基因在弓形虫的生长、入侵、毒力中发挥重要作用,为进一步探究SRS20A的功能和作用机制提供了参考。
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