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牛病毒性腹泻/黏膜病病毒荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张康;郭志廷;仇正英;张景艳;王磊;张凯;王贵波;梁芬芬;马倩;李建喜

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒; 5′UTR; 实时荧光定量PCR; RNA标准品

期刊名称：福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2021 年 36 卷 09 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 【目的】设计一种能够快速检测出牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus, BVDV）的方法。【方法】依据GenBank公布的BVDV 5′UTR基因属于特异性保守区域的前提,构建具有特异性的探针和引物,以体外转录病毒RNA作为绝对定量标准品。对荧光定量RT-PCR方法的各反应条件进行优化,创建BVDV荧光定量PCR检测方法。【结果】5.026 7 copies·μL-1是此检测方法的最低下限值,该方法拥有良好的重复性,变异系数在组内、组间均<1%。特异性较高,对其他病毒核酸的扩增均为阴性,如猪瘟病毒、口蹄疫病毒等。【结论】建立的BVDV荧光定量PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,为牛病毒性腹泻的早期诊断提供了重要的技术支撑。

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